おとり遺伝子による血管新生抑制を標的とした癌遺伝子治療法の開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12671830
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 石橋 浩晃 九州大学, 大学院・歯学研究院, 助手 (90254630)
• 研究分担者: 白砂 兼光 九州大学, 大学院・歯学研究院, 教授 (30093420)
• キーワード: 悪性新生物 / 血管新生 / 遺伝子治療

研究概要

1)細胞培養実験による各種サイトカイン刺激による血管新生遺伝子の発現状況の解析
培養口腔扁平上皮癌細胞,唾液腺癌細胞を用いて,TNFα刺激による血管内皮増殖因子(VEGF),トランスフォーミング増殖因子β1(TGFβ1)および組織因子(TF)の発現亢進を確認した.
2)血管新生因子の産生に関与する転写因子の解明
各培養癌細胞において,TNFα刺激および低酸素環境下での培養により,転写因子Sp1およびAP-1がそれぞれ活性化することを,バンドシフトアッセイにより確認した、
3)HVJ-リポソーム法による遺伝子導入条件の確立
HVJ-リポソーム法により,おとり遺伝子を100%の培養細胞に導入する条件を確立した.また,遺伝子導入により細胞障害が発生しないことを確認した.
4)おとり遺伝子導入による血管新生抑制効旺の検討
Sp1のおとり遺伝子をHVJ-リポソーム法により培養癌細胞に遺伝子導入すると,TNFαで促進されるVEGF, TGFβ, TFの発現亢進を同時に抑制できることを解明した.

研究成果

• [文献書誌] Ishibashi H, et al.: "Sp1 Decoy Transfected Cells Suppresses the Expression of VEGE, TGFβ1, and Tissue Facotr and also Cell Grwoth and Invasion Activites"Cancer Research. 60. 6531-6536 (2000)
• [文献書誌] Ishibashi H, et al.: "Hypoxia-Induced Angiogenesis of Cultured Human Salivary Gland Carcinoma CellsInvolves Enhancement VEGF Production and bFGF Release"Oral Oncology. 37. 77-83 (2001)
• [文献書誌] Nakagawa K, Chen Y, Ishibashi H, et al.: "Angiogenesis and its regulation : roles of vascular endothelial cell growth factor (VEGE)"Semin Thromb Hemost. 143. 201-206 (2000)
• [文献書誌] LiC Y, Shirasuna K, Ishibashi H: "Epithelial-myoepithelial carcinoma arising in pleomorphic adenoma of the palate"Oral Surg Oral Med Oral Pathol. 190. 154-156 (2000)