ナチュラルキラー細胞活性化レセプターおよびその認識するリガンドの解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12672107
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 松本 直樹 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 助教授 (40239108)
• 研究分担者: 山本 一夫 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 教授 (20174782)
• キーワード: NK細胞 / 活性化レセプター / NKR-P1 / NKp46 / B細胞 / 先天性免疫 / 膜型IgM

研究概要

ナチュラルキラー(NK)細胞は、活性化レセプターならびに抑制性レセプターを用いて標的細胞の認識を行う。しかしながら、活性化レセプターについては未知の点が多い。本研究では、リガンドが明らかにされていないいわゆるオーファントレセプターであるNK細胞活性化レセプターNKR-P1ならびにNKp46についてそのリガンドを明らかにすることを目的として研究を行った。
NKR-P1ならびにNKp46について、細胞外領域を大腸菌で発現後、試験管内でリフォールデイングを行い、可溶型レセプターを作成することに成功した。このうち、可溶型(s)NKR-P1について50種類以上の培養細胞株におけるNKR-P1リガンドの発現を検索したところ、あるBリンホーマ細胞株にのみsNKR-P1が結合し、NKR-P1リガンドを発現しているものと考えられた。この細胞上のNKR-P1リガンドの性状を明らかにするため、zNKR-P1の細胞への結合を阻害する抗NKR-P1リガンド抗体H19を作製した。H19抗体が認識する分子を免疫沈降法で解析したところ、リンホーマ上のNKR-P1リガンドは膜型IgMであることが明らかになった。また、sNKR-P1はこのBリンホーマ細胞の他、マウスB細胞のうち先天性免疫を担うとされるB1B細胞の部に結合した。今回の発見により、NK細胞とB1B細胞という先天性免疫を担う2つのリンパ球集団の間に予期しなかったネットワークが存在する可能性が示唆された。今後、今回の発見の生理的意義を解明することが必要とされる。また、NKp46について可溶型レセプターが作製されたことにより、今後のリガンド探索の基盤が確立できた。

研究成果

• [文献書誌] Matsumoto N., Mitsuki M., Tajima K., Yokoyama W.M., Yamamoto K.: "The Functional Binding Site for the C-Type Lectin-Like NK Cell Receptor Ly49A Spans Three Domains of Its MHC Class I Ligand"J. Exp. Med.. 193. 147-157 (2001)
• [文献書誌] Matsumoto N., Tajima K., Yamamoto K., Mitsuki M.: "H-2 allele specificity of the NK cell C-type lectin-like MHC class I receptor Ly49A visualized by soluble Ly49A tetramer"Internationa Immunol.. 13. 615-623 (2001)
• [文献書誌] Matsumoto N., Yokoyama W.M., Kojima S., Yamamoto K.: "The NK cell MHC class I receptor Ly49A detects mutations on H-2D^d inside and outside of the peptide binding groove"J. Immunol.. 166. 4422-4428 (2001)
• [文献書誌] 松本直樹: "NK細胞抑制性レセプターによるリガンド認識"炎症と免疫. 9. 513-523 (2001)
• [文献書誌] Matsumoto N., Mitsuki M., Tajirna K., Yokoyarna W.M., Yamamoto K.: ""Activating and Inhibitory Immunoglobulin-Like Receptors" 27 Identification of the functional recognition site on MHC class I for a NK cell lectin-like receptor pp.215-223"Springer-Verlag Tokyo Eds, M.D. Cooper, T. Takai, and J.V. Ravetch. 246 (2001)