疾患組織から産生される酸化脂質の同定

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12672121
• 研究機関: 帝京大学
• 研究代表者: 高野 達哉 帝京大学, 薬学部, 教授 (40124995)
• 研究分担者: 東 祐輔 帝京大学, 薬学部, 助手 (60286979) ; 森 雅博 帝京大学, 薬学部, 助手 (00230079) ; 板部 洋之 帝京大学, 薬学部, 助教授 (30203079) ; 藤本 康之 帝京大学, 薬学部, 助手 (60317724)
• キーワード: 動脈硬化 / 腎疾患 / 体外診断薬 / 酸化リポタンパク質 / 過酸化脂質 / モノクローナル抗体

研究概要

組織を構成する細胞には、酸化物の生成を未然に防ぐ防御機構と生成された酸化物の排除機構がある。しかし、細胞壊死をともなう疾患では、この酸化物生成に対する防御ならびに排除機構は低下し、疾患部位に蓄積する酸化物は増加する。疾患局所で生成された不安定な酸化脂質は、病巣周辺のペプチドと結合して複合体を形成し疾患部位に蓄積する。しかも、その一部は血中に流出する可能性が高い。
本研究は抗酸化脂質抗体を一次抗体に、疾患臓器・組織に特異性の高いペプチドに対する抗体を二次抗体とするサンドイッチELISAにより、疾患組織由来の酸化脂質を血中で測定することにより、各種疾患と酸化脂質との関連性を解析した。具体的には
1.各種ヒト疾患臓器・組織のホモジェネートを抗原とし、酸化脂質をエピトープとする一次抗体(酸化リン脂質、酸化コレステロール、コレステリルエステル、酸化トリグリセリドなど)を調製した。
2.ヒト疾患臓器・組織のホモジェネートあるいは組織特異性の高いペプチドを抗原とし、疾患臓器・組織に特異的な二次抗体を調製した。
3.抗酸化脂質抗体(一次抗体)と疾患組織依存性の高い二次抗体のサンドイッチELISA法により測定し、疾患組織依存性の高い酸化脂質の測定法を検索しつつある。

研究成果

• [文献書誌] Khono,H.,Takano,T. et,al.: "Simple and practical sandwich-type enzyme immunoassay for human oxidatively modified low density lipoprotein using antioxidized phosphatidylcholine monoclonal.."Clinical Biochem.. 33(4). 243-253 (2000)
• [文献書誌] Itabe,H.,Takano,T. et.al.: "Preparation of radioactive aldehyde-containing phosphatidylcholine"Analyticlal Biochem.. 285. 151-155 (2000)
• [文献書誌] Toshima,S.,Takano.T. et.al.: "Circulating oxidized low density lipoprotein levels - A biochemical risk marker for coronary heart disease"Arterioscler Thromb Vasc Biol.. 20. 2243-2247 (2000)
• [文献書誌] Itabe,H.,Takano,T. et.al.: "Lysosomal accumulation of oxidized phosphatidylcholine-apolipoprotein B complex in macrophages : intracellular fate of oxidized low density lipoprotein"Biochim.Biophys.Acta. 1487. 233-245 (2000)
• [文献書誌] Fukasawa,M.,Takano,T. et.al.: "Reduction of sphingomyelin level without accumulation of ceramide in chinese hamster ovary cells affects detergent-resistant membrane domains and ...."J.Biol.Chem.. 275(44). 34028-34034 (2000)
• [文献書誌] Imanaka,T.,Takano,T., et.al.: "Characterizaion of the 70-kDa peroxisomal membrane protein, and ATP binding cassette transporter."J.Biol.Chem.. 274(17). 11968-11976 (1999)
• [文献書誌] Mori,M.,Takano,T. et.al.: "Presensce of phospholipid-neutral lipid complex structures in atherosclerotic lesions as detected by a novel monoclonal antibody"J.Biol.Chem.. 274(35). 24824-24837 (1999)
• [文献書誌] Itabe,H.,Takano,T. et.al.: "Metabolism of oxidized phosphatidylcholines formed in oxidized low density lipoprotein by lecithin-cholesterol acyltransferase"J.Biochem.. 126(1). 153-161 (1999)
• [文献書誌] Sakata,N.,Takano,T. et.al.: "Immunohistochemical localization of different epitopes of advanced glycation end products inhuman atherosclerotic lesions."Atherosclerosis. 141. 61-75 (1999)
• [文献書誌] 板部洋之,高野達哉: "The Lipid"リポ蛋白「酸化」の生化学とリポ蛋白代謝. 236-241 (1999)