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アセトアセチルCoA(AACoA)合成酵素はケトン体であるアセト酢酸をアセトアセチルCoAに活性化する酵素であり、本酵素の発現がコレステロール低下剤により誘導されることから、糖尿病や高脂血症などの脂質代謝異常による疾病と深く関連していると考えられている。最近、我々はラットのAACoA合成酵素のcDNAを得ることに成功し新規遺伝子であることを確認した。本研究ではこの遺伝子を用いて本酵素の生化学的・生理学的役割を分子レベルで明らかにすることを目的とし、得られた知見に基づく病態治療薬の開発を最終目標とする。先ず、ラットAACoA合成酵素の生体内動態を解析するため、各臓器のRNAを単離し、本酵素のcDNAを用いてノザンハイブリダイゼーションを行い臓器中の発現量を測定した。本酵素は、雄では脳、腎臓、肝臓、心臓の順に、雌では脳、肝臓、腎臓、心臓の順に多く発現し、肝臓では雌に、その他の臓器では雄に多く存在していた。次に、ヒトAACoA合成酵素遺伝子のスクリーニングを行った。ヒトmRNAから合成したcDNAとラットAACoA合成酵素遺伝子の塩基配列に基づいた二種のプライマーでPCRを行い本酵素の遺伝子断片を得た。これを用いてヒトcDNAライブラリーをスクリーニングし完全長のヒトAACoA合成酵素のcDNAをクローニングした。得られたcDNAは2016ヌクレオチドから成り、ごの塩基配列から決定したアミノ酸配列はラットAACoA合成酵素と89.3%の相同性を示した。以上の結果から、ラットAACoA合成酵素の臓器分布に性差があること、脳に高発現していることが明らかとなった。また、ヒトAACoA合成酵素のcDNAをクローニングすることができた。
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