人生体成分からのHelicobacter pyloriの標的糖鎖の検索と構造解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12680619
• 研究機関: 東海大学
• 研究代表者: 小島 直也 東海大学, 工学部, 助教授 (30183338)
• キーワード: Helicobacter pylori / 胃液 / 糖鎖 / 接着 / ルイスb型血液型糖鎖 / スルファチド

研究概要

Helicobacter pyloriは胃潰瘍の原因菌と考えられており、胃癌との関連性も指摘されている。H.pyloriがどのように胃潰瘍を引き起こすかは依然不明であるが、胃粘膜上皮への菌の接着とコロニーの形成が胃潰瘍発症の最も初期で重要な段階であるとされている。多くの研究からH.pyloriのレセプター分子のひとつとして胃粘膜上皮上に発現している糖鎖が有力視されているが、いまだにどのような糖鎖が実際のレセプターとして働いているかは明らかとはなっていない。本研究では、H.pyloriがどのような構造を有する糖鎖がH.pyloriのレセプターとして働いているかを明らかにすることを目的としている。本年度は、様々な臨床分離株を用いて胃液への接着性を検討すると共に、胃液からのレセプターの単離を試みた。
5種類の臨床分離株の接着性を検討したところ、すべての株がヒト胃液に対して強い接着性を示した。この胃液に対する接着は過ヨウ素酸酸化に感受性であるが、シアリダーゼ処理に対しては抵抗性を示した。この結果は、胃液中に含まれるレセプターが糖鎖であるが、シアル酸を含む糖鎖ではないことを示している。さらに、これまで提唱されているスルファチドやルイスb型血液型糖鎖に対しては株ごとに接着性が異なり、これらの糖鎖に対して全く接着性を示さない株が存在した。また、ヒト胃液に対する接着はスルファチドやルイスb型血液型糖鎖では全く阻害されなかった。従って、ヒト胃液中にはH.pyloriの様々な株が共通して認識するような糖鎖が存在すると予想され、またその糖鎖はこれまでに提唱されている糖鎖とは構造的に異なると考えられた。そこで、胃液をグアニジン塩酸中でゲルろ過に供し、溶出したそれぞれのフラクションに対する接着性と様々なレクチンとの反応性を検討した。その結果、に対して明瞭に接着性を有する画分が得られた。現在、この胃液中の成分についての糖鎖構造の同定を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Shimizu, Y: "Rapid and simple preparation of N-linked oligosaccharides by cellulose column chromatography"Carbohydr.Res. 332. 381-388 (2001)
• [文献書誌] Tang.W.: "Requirement of ceramides for adhesion of Helicobacter pylori to glycosphingolipids"FEBS Lett. 504. 31-35 (2001)
• [文献書誌] Kuroda, Y: "Abnormal IgG galactosylation and arthritis in MRL-Fas^<lpr> or MRL-FasL^<gld> mice are under the control of the MRL genetic background"FEBS Lett. 507. 210-214 (2001)
• [文献書誌] Kuroda, Y: "Abnormal IgG galactosylation in MRL-lpr/lpr mice:pathogenic roles on the development of arthriti"Pathol.Int. 51. 909-915 (2001)
• [文献書誌] Kuroki, A: "Level of Galactosylation Determines Cryoglobulin Activity of Murine IgG3 Monoclonal Rheumatoid Factor"Blood. (in press).
• [文献書誌] Taniguchi, N(Ed.): "Handbook of Glycosyltransferases and Related Genes"Splinger-Verlag Tokyo. 670 (2001)