2000 年度実績報告書

SCFユビキチンリガーゼを制御するユビキチン様蛋白質Rub1の解析

研究課題

研究課題/領域番号	12680709
研究機関	(財)東京都医学研究機構
研究代表者	千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)
キーワード	ユビキチン / プロテアソーム / NEDD8 / Cullinファミリー蛋白質 / ユビキチンリガーゼ / 蛋白質分解 / 細胞周期 / シグナル伝達
研究概要	I型に属するユビキチン様蛋白質はユビキチンシステムと類似した独自の酵素系で標的蛋白質に共有結合する.ユビキチンと最も相同性の高いNEDD8のE1様酵素はAPP-BP-1とUba3の異種複合体であり,E2様酵素はUbc12である.NEDD8の標的蛋白質はCullinファミリー蛋白質であり,それは多様なE3ユビキチンリガーゼのコアサブユニットである.NEDD8修飾系は真核生物を通じて保存されており,その生理学的意義を明らかにする目的で,まずUba3のノックアウトマウスを作製し多細胞生物における役割を解析した.また分裂酵母を用いた遺伝学的な解析も行ない,NEDD8修飾系がCullinファミリー蛋白質の機能に必須であることを明らかにした.その分子機構については,まずCullin1をコアとするSCFユビキチンリガーゼを組み換え蛋白質として精製し試験管内ユビキチン化反応系を構築した.そしてNEDD8修飾系によるユビキチンリガーゼ活性制御を解析した.これらの結果からNEDD8修飾系はSCFユビキチンリガーゼ活性を促進し,Cullinファミリー蛋白質の機能に必須であることを明らかにした.またノックアウトマウスの解析からNEDD8修飾系はCullinファミリー蛋白質による蛋白質分解を制御し,細胞周期制御のみならず個体の形態形成に必須であることが明らかとなった.

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Hori,T., et.al: "Covalent modification of all members of human cullin family proteins by NEDD8."Oncogene. 18. 6829-6834 (1999)
[文献書誌] Osaka,F., et.al.: "Covalent modifier NEDD8 is essential for SCF ubiquitin-ligase in fission yeast"EMBO.J.. 19. 3475-3484 (2000)
[文献書誌] Suzuki,H., et.al.: "Homodimer of two F-box proteins, β TrCP1 or β TrCP2, binds to I κ B α for signal-dependent ubiquitination."J.Biol.Chem.. 275. 2877-2884 (2000)
[文献書誌] Nishimori S, et.al.: "Smad-mediated transcription is required for TGF-β 1-induced p57Kip2 proteolysis in osteoblastic cells."J.Biol.Chem.. 276. (2001)
[文献書誌] Kawahara,H., et.al.: "Developmentally regulated, alternative splicing of the Rpn10 gene generates multiple forms of 26S proteasomes."EMBO.J.. 19. 4144-4153 (2000)
[文献書誌] Shimura,H., et.al.: "Familial Parkinson's disease gene product, Parkin, is a ubiquitin-protein ligase."Nat.Genet.. 25. 302-305 (2000)
[文献書誌] 千葉智樹: "NEDD8システム"田中啓二,大隈良典編集実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊土社. 120-126 (2001)
[文献書誌] 鈴木俊顕,高橋芳充,田中克典,千葉智樹: "ユビキチン類似蛋白質(SUMO-1とRub1)-細胞機能を制御する新しい修飾分子"田中啓二編集モレキュラー・メディシン特集:ユビキチンシステムと癌中山書店. 216-227 (2000)

2000 年度 実績報告書

SCFユビキチンリガーゼを制御するユビキチン様蛋白質Rub1の解析

研究代表者

千葉 智樹 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)

研究成果

[文献書誌] Hori,T., et.al: "Covalent modification of all members of human cullin family proteins by NEDD8."Oncogene. 18. 6829-6834 (1999)

[文献書誌] Osaka,F., et.al.: "Covalent modifier NEDD8 is essential for SCF ubiquitin-ligase in fission yeast"EMBO.J.. 19. 3475-3484 (2000)

[文献書誌] Suzuki,H., et.al.: "Homodimer of two F-box proteins, β TrCP1 or β TrCP2, binds to I κ B α for signal-dependent ubiquitination."J.Biol.Chem.. 275. 2877-2884 (2000)

[文献書誌] Nishimori S, et.al.: "Smad-mediated transcription is required for TGF-β 1-induced p57Kip2 proteolysis in osteoblastic cells."J.Biol.Chem.. 276. (2001)

[文献書誌] Kawahara,H., et.al.: "Developmentally regulated, alternative splicing of the Rpn10 gene generates multiple forms of 26S proteasomes."EMBO.J.. 19. 4144-4153 (2000)

[文献書誌] Shimura,H., et.al.: "Familial Parkinson's disease gene product, Parkin, is a ubiquitin-protein ligase."Nat.Genet.. 25. 302-305 (2000)

[文献書誌] 千葉智樹: "NEDD8システム"田中啓二,大隈良典 編集 実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊土社. 120-126 (2001)

[文献書誌] 鈴木俊顕,高橋芳充,田中克典,千葉智樹: "ユビキチン類似蛋白質(SUMO-1とRub1)-細胞機能を制御する新しい修飾分子"田中啓二 編集 モレキュラー・メディシン特集:ユビキチンシステムと癌 中山書店. 216-227 (2000)

2000 年度実績報告書

千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)

[文献書誌] 千葉智樹: "NEDD8システム"田中啓二,大隈良典編集実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊土社. 120-126 (2001)

[文献書誌] 鈴木俊顕,高橋芳充,田中克典,千葉智樹: "ユビキチン類似蛋白質(SUMO-1とRub1)-細胞機能を制御する新しい修飾分子"田中啓二編集モレキュラー・メディシン特集:ユビキチンシステムと癌中山書店. 216-227 (2000)