2001 年度実績報告書

SCFユビキチンリガーゼを制御するユビキチン様蛋白質Rub1の解析

研究課題

研究課題/領域番号	12680709
研究機関	(財)東京都医学研究機構
研究代表者	千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)
キーワード	NEDD8 / SCF複合体 / ノックアウトマウス / 細胞周期 / ユビキチン / 蛋白質分解 / p57kip2 / β-catenin
研究概要	I型に属するユビキチン様蛋白質はユビキチンシステムと類似した独自の酵素系で標的蛋白質に共有結合する.ユビキチンと最も相同性の高いRub1/NEDD8のE1様酵素はAPP-BP-1とUba3の異種複合体であり,E2様酵素はUbc12である.NEDD8の標的蛋白質はCullinファミリー蛋白質であり,それは多様なE3ユビキチンリガーゼのコアサブユニットである,NEDD8修飾系は真核生物を通じて保存されており,その生理学的意義を明らかにする目的で,まずUba3のノックアウトマウスを作製し多細胞生物における役割を解析した.また分裂酵母を用いた遺伝学的な解析も行ない,NEDD8修飾系がCullinファミリー蛋白質の機能に必須であることを明らかにした.その生化学的な分子機構については,まずCullin1をコアとするSCFユビキチンリガーゼを組み換え蛋白質として精製し試験管内ユビキチン化反応系を構築した.そしてNEDD8修飾系によるユビキチンリガーゼ活性制御を解析した.これらの結果からNEDD8修飾系はE2酵素をSCF複合体にリクルートし,ユビキチンリガーゼ活性を促進することを明らかにした.またノックアウトマウスの解析から,Uba3欠損マウスは早期胎生致死であり,NEDD8修飾系はホ乳動物の細胞周期制御や形態形成シグナルの制御に必須であることが判明した.

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kawakami T.: "NEDD8 recruits E2-Ubiquitin to SCF E3-ligase."EMBO J.. 20. 4003-4012 (2001)
[文献書誌] Tateishi K.: "The NEDD8 system is essential for cell cycle progression and morphogenetic pathway in mice."J. Cell Biol.. 155. 571-579 (2001)
[文献書誌] Fukuchi M.: "Ligand-dependent degradation of smad3 by a ubiquitin ligase complex of roc1 and associated proteins."Mol. Biol. Cell. 12. 1431-1443 (2001)
[文献書誌] Tanaka K.: "Control of IκBα proteolysis by the ubiquitin-proteasome pathway."Biochimie. 83. 351-356 (2001)
[文献書誌] Osaka F.: "Covalent modifier NBDD8 is essential for SCF ubiquitin-ligase in fission yeast."EMBO J.. 19. 4144-4153 (2000)
[文献書誌] Suzuki H.: "Homodimer of two F-box proteins βTrCP1 or βTrCP2 binds to IκBα for signal-dependent ubiquitination."J. Biol. Chem.. 275. 2877-2884 (2000)
[文献書誌] 千葉智樹: "NEDD8システム"田中啓二, 大隈良典編集実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊士社. 226(120-126) (2001)

2001 年度 実績報告書

SCFユビキチンリガーゼを制御するユビキチン様蛋白質Rub1の解析

研究代表者

千葉 智樹 財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)

研究成果

[文献書誌] Kawakami T.: "NEDD8 recruits E2-Ubiquitin to SCF E3-ligase."EMBO J.. 20. 4003-4012 (2001)

[文献書誌] Tateishi K.: "The NEDD8 system is essential for cell cycle progression and morphogenetic pathway in mice."J. Cell Biol.. 155. 571-579 (2001)

[文献書誌] Fukuchi M.: "Ligand-dependent degradation of smad3 by a ubiquitin ligase complex of roc1 and associated proteins."Mol. Biol. Cell. 12. 1431-1443 (2001)

[文献書誌] Tanaka K.: "Control of IκBα proteolysis by the ubiquitin-proteasome pathway."Biochimie. 83. 351-356 (2001)

[文献書誌] Osaka F.: "Covalent modifier NBDD8 is essential for SCF ubiquitin-ligase in fission yeast."EMBO J.. 19. 4144-4153 (2000)

[文献書誌] Suzuki H.: "Homodimer of two F-box proteins βTrCP1 or βTrCP2 binds to IκBα for signal-dependent ubiquitination."J. Biol. Chem.. 275. 2877-2884 (2000)

[文献書誌] 千葉 智樹: "NEDD8システム"田中啓二, 大隈良典 編集 実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊士社. 226(120-126) (2001)

2001 年度実績報告書

千葉智樹財団法人東京都医学研究機構, 東京都臨床医学総合研究所, 研究員 (00311423)

[文献書誌] 千葉智樹: "NEDD8システム"田中啓二, 大隈良典編集実験医学増刊:蛋白質分解の最前線2001 羊士社. 226(120-126) (2001)