タウオパチー患者脳のタウ蛋白における異常修飾の検索、同定

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12680727
• 研究機関: (財)東京都医学研究機構
• 研究代表者: 長谷川 成人 財団法人東京都医学研究機構, 東京都精神医学総合研究所, 副参事研究員 (10251232)
• キーワード: タウ / 微小管 / 神経変性疾患 / リン酸化 / スプライシング / Cdk5

研究概要

(1)新規タウ遺伝子変異に関する解析
国内外で発見された新規のタウ遺伝子変異の変異効果の解析と、患者剖検脳の可溶性、不溶性タウの解析をおこなった。ミスセンス変異の場合、程度の差はあるがタウの微小管重合促進能を低下させる効果が観察された。
(2)タウ蓄積を伴わない前頭側頭型痴呆患者脳の解析
タウの蓄積が認められない前頭側頭型痴呆患者剖検脳の可溶性タウ、不溶性タウを解析すると共に、その他のマーカ分子のmRNAと蛋白質をRT-PCRとイムノブロットで解析した。脳重が1000g以下の重度の神経細胞脱落がみられる症例において可溶性タウの減少、消失が観察された。これらのケースにおいては3RタウのmRNAの発現も減少していた。さらに神経細胞のマーカーであるNF-MのmRNAの減少もみられ、両者の間に有意な相関関係が認められた。可溶性タウの解析からはタウのスプライシング異常を示唆する知見は得られなかった。
(3)蓄積タウの翻訳後修飾の解析
ピック病(PiD)、イントロン変異を有するFTDP-17の剖検脳からの不溶性タウの精製方法を検討した。ピック病患者剖検脳の蓄積するタウは一般的な調製法では回収される量が少なく、新しい精製方法の開発を行った。その結果、比較的収率よく不溶性タウを回収することが可能となった。現在精製をおこない、リン酸化を含めたタウの翻訳後修飾を検索中である。

研究成果

• [文献書誌] Miake T, Mizusawa H, Iwatsubo T, Hasegawa M: "Biochemical characterization of the core structure of alpha-synuclein filaments"J Biol Chem. 277. 19213-19219 (2002)
• [文献書誌] Kahle PJ, Neumann M, Hasegawa M, et al.: "Hyperphosphorylation and insolubility of alpha-synuclein in transgenic mouse oligodendrocytes"EMBO Rep. 3. 583-588 (2002)
• [文献書誌] Neumann M, Kahle PJ, Hasegawa M, et al.: "Misfolded proteinase K-resistant and hyperphosphorylated alpha-synuclein in aged transgenic mice with locomotor deterioration and in human alpha-synucleinopathies"J Clin Invest. 110. 1429-1439 (2002)
• [文献書誌] Hasegawa M, Fujiwara H, Nonaka T, et al.: "Phosphorylated alpha-synuclein is ubiquitinated in alpha-synucleinopathy lesions"J Biol Chem. 277. 49071-49076 (2002)
• [文献書誌] Kobayashi T, Hasegawa M, et al.: "A novel L266V mutation of the tau gene causes frontotemporal dementia with a unique tau pathology"Ann Neurol. 53. 133-137 (2003)