| 研究概要 |
幼若ラットは、元来母のにおいと母性行動による体性感覚刺激の対提示による古典的条件付けにより、母のにおいを学習する自然なモデルであることがあげられる。体性感覚刺激をより再現性・定量性に優れた電撃を用いることにより、生後12日目のラットににおいの嫌悪学習を成功させている。これまでに嗅球内にbicucullineの注入が、においの嫌悪学習が促進さることから、嗅球内シナプスの可塑性がこの学習に関与する可能性が示唆された。
一方記憶学習の基盤と考えられているシナプス可塑性には細胞内カスケードにおいてCREB(cyclic AMP response binding protein)の関与が知られている。そこで嗅球内シナプス可塑性とCREBとの関与を検索するための実験を行いこれまでのところ以下のような結果が得られた。
1)CREB合成を阻害する目的で、CREB antisense ODNを嗅球内に注入すると、においの学習が阻害された。
2)においと電撃の対提示トレーニングを施した動物の嗅球を摘出し、その核抽出液を用いてCREBおよびリン酸化CREBに対するウェスタンブロッティングを行った。さらにCREBリン酸化反応の時間的経過を検索するために嗅球摘出時間をずらした。すると、学習成立条件ではリン酸化CREBは増加しはじめ、1〜2時間後がピークとなり、4時間後まで持続した後6時間後で消失した。
3)CREBのリン酸化に関わる酵素の検索を目的とするために、CaMKII, MAPK, PKAの阻害剤を注入した。するといずれも濃度依存性ににおいの嫌悪学習成立を阻害した。またこれらの嗅球を用いてウェスタンブロッティングをおこなうと、いずれもリン酸化CREBの増加が抑制されていた。これは可塑性成立にはこれらすべての作用が必要であることを示唆している。
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