マウス個体内におけるヒトリンパ組織の再現系の確立と応用

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12680806
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 小柳 義夫 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (80215417)
• キーワード: NOD-SCIDマウス / アポトーシス / HIV / TRAIL / 移植マウス / CD4陽性T細胞破壊 / 脾臓 / リンパ節構造

研究概要

1.マウスへのヒトリンパ球移植術の改良
NOD-SCIDマウスへのヒト末梢血単核球の移植実験系を完成させた。1×10^7個のヒト末梢血単核球を腹腔に接種し、ヒトリンパ組織の構築実験を行うと、接種された腹腔内、そして、脾臓においてCD4陽性、ならびにCD8陽性T細胞が定着した。特に脾臓内には小動脈周囲にCD20陽性のB細胞が集積し、その周りをCD4陽性T細胞、さらに、CD8陽性T細胞が取り囲むリンパ節様の構造をとることがわかった。ヒト末梢血移植時の、マウス個体内において増殖するT細胞は、マウスの抗原に対する反応性T細胞と考えられている。すなわち、Xenoreactiveな免疫反応が起きていると知られているが、これらの細胞が組織構造を形成することがわかった。
2.移植ヒトリンパ組織へのウイルス感染の影響
エイズウイルスであるHIVはヒトの細胞においてのみ増殖する。そこで、このヒト末梢血を移植したマウスへの感染を行い、ウイルス感染による細胞破壊作用とこのウイルス感染による組織構造変化を解析した。HIV感染実験の結果、CD4陽性のヒトT細胞がTUNEL染色により、陽性となり、アポトーシスに陥いり細胞数が極端に減少していることがわかった。そして、TNF関連アポトーシス誘導分子であるTNF、FasL、そしてTRAIL分子の発現を検討すると、TRAIL発現CD4陽性T細胞がこのTUNEL陽性細胞に隣接していることがわかった。さらに、TRAILに対する中和抗体を接種すると、TUNEL陽性の細胞は明らかに減少したことより、このTRAIL発現細胞がCD4陽性T細胞にアポトーシスシグナルを送っていることがわかった。すなわち、HIVによるリンパ組織の破壊過程が明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Takahashi K: "Structural requirement for the two-step dimerization of human immunodeficiency virus type-1 genome"RNA. 6. 96-102 (2000)
• [文献書誌] Momoi Y: "Pertusis toxin enhances human immunodefieicncy virus-1 replication"AIDS Research Human Retroviruses. 16. 373-379 (2000)
• [文献書誌] Tsunetsugu-Yokota Y: "Transcriptional regulation of HIV-1 LTR during antigen-dependent activation of primary T-cell by dendritic cells"Journal of Leukocyte Biology. 67. 432-440 (2000)
• [文献書誌] Takahashi K: "NMR analysis of intra-and inter-molecular stems in the dimerization initiation site of the HIV-1 genome"Journal of Biochemistry. 127. 681-686 (2000)
• [文献書誌] Kusagawa,S: "Isolation and characterization of full-length molecular DNA clones of Ghanaian HIV-1 intersubtype A/G recombinant (CRF02_AG) which is replication-competent in restricted host-range"AIDS Research Human Retroviruses. (印刷中).
• [文献書誌] Miura Y: "Critical contribution of TNF-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) to apoptosis of human CD4^+ T cells in HIV-1-infected hu-PBL-NOD-SCID mice"Journal of Experimental Medicine. (印刷中).