| 研究概要 |
これまでに、植物においては新たな形質の付与による除草剤耐性や殺虫性タンパク質発現植物などが実用化されている。しかしウイルス耐性植物については、ある種の耐性遺伝子を導入しても限られた範囲のウイルスにしか耐性を生じないことから実用化に課題が残されていた。従来耐性植物はウイルスの外被タンパク質遺伝子や複製酵素遺伝子等の導入によって作出されており、またウイルスの干渉現象のメカニズムに迫る知見として、「脱外被阻止」や「ジーンサイレンシング」など耐性メカニズムに関わる種々の重要な現象が発見されている。そこで本研究では、これまであまり調査されてこなかった「宿主因子の関与」に焦点を当て、ウイルス耐性組換え植物における宿主因子の解明をめざし、そのための基礎的な知見を蓄積することを目的としている。特に植物ウイルス中最大であり、非常に深刻な被害をもたらすpotyvirusは、その外被タンパク質遺伝子の導入によって「広域抵抗性」を示す組換え植物が当研究室において作出されており、将来的に、非常の多くの植物ウイルス種を用いて宿主因子の遺伝子発現をモニターできる可能性を秘めている。まず、今年度の取り組みとしては、当研究室の広域耐性を付与した組換え植物の育成を行い、組換え植物育成温室においてウイルス接種試験を行うとともにその耐性を確認した。接種試験に先立ち、当研究室において保存されていた種々の植物ウイルス分離株を維持継代し、変異等が入ってないことについても確認中である。また、核移行シグナルを持つpotyvirusの細胞質封入体(NIa,NIb)が、何らかの宿主因子と相互作用している可能性を探るため、in vivoでの物理的タンパク質問相互作用の解明に向けてtwo-hybrid法の導入を目指し、酵母L40株の維持継代やbait,prayのコンストラクトの構築に取り組んだ。
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