マウス膀胱癌におけるp53遺伝子の機能異常の酵母を用いた検索

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12770116
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 森村 圭一朗 大阪市立大学, 医学部, 助手 (30315999)
• キーワード: マウス膀胱癌 / p53遺伝子 / Yeast Functional Assay / N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine / C3H / He / Shiマウス / NON / Shiマウス / 相同染色体分布 / 遺伝子多型

研究概要

本実験は化学膀胱発癌感受性の異なる2種類のマウスを親とする2種類のレシプローカルな雄性F1マウスを用い、発がん実験により得られた膀胱癌におけるp53遺伝子変異の相同染色体分布を、酵母を用いた新しい方法で検索しすることを目的としている。研究初年度として、本年度は動物の繁殖および発癌実験を行った。
膀胱発癌感受性の比較的高いNON/Shi(NON)マウスとNONに比べ感受性の低いC3H/He/Shi(C3H)マウスをレシプローカルに交配し2種の雄性F1マウス、C3H×NONおよびNON×C3Hをそれそれ40匹ずつを得た。6週令のこれらのF1マウスにそれぞれN-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamineを0.05%の濃度で12週間にわたって飲料水投与しその後12週間の無処置期間をおいた後、エーテル麻酔下に屠殺、膀胱腫瘍を摘出した。発生した腫瘍はすべて膀胱癌であり、その発生頻度はC3H×NON群が78%、NON×C3H群が87%であった。両者の間には有意差は認めなかった。p53遺伝子変異異常を検索するにあたり、p53遺伝子変異をその転写活性化能を加味して検索できるYeast Functional Assay法を用いた。また、NONマウスとC3Hマウスの間にはp53遺伝子exon 7 codon 248に多型が認められるため、これをランドマークとして遺伝子変異の相同染色体分布を決定することが可能となる。現在までにC3H×NON群に認められた膀胱癌のうち3例についてこの方法を用いて検索を行なったところ3例ともにp53遺伝子変異を認めている。来年度はさらに腫瘍の解析を行う予定である。

研究成果

• [文献書誌] Morimura,K.: "LOH and mutational analysis of p53 alleles in muose urinary bladder carcinomas induced by N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) nitrosamine."Carcinogenesis. 20. 715-718 (1999)
• [文献書誌] Yamamoto,S.: "Specific p53 gene mutations in urinary bladder epithelium after the Chernobyl accident."Cancer Res.. 59. 3606-3609 (1999)
• [文献書誌] Chen,T.: "Concentration dependent promoting effects of sodium L-ascorbate with the same total dose in a rat two-stage urinary bladder carcinogenesis."Cancer Lett.. 146. 67-71 (1999)
• [文献書誌] Salim,E.I.: "Inhibitory effect of 1,3-diaminopropane, an ornithine decarboxylase inhibitor, on rat two-stage urinary bladder carcinogenesis initiated by N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) nitrosamine."Carcingenesis.. 21. 195-203 (2000)
• [文献書誌] Romanenko,A.: "Increased oxidative stress with gene alteration in urinary bladder urothelium after the Chernobyl accident."Int.J.Cancer,. 86. 790-798 (2000)
• [文献書誌] Wei,M.: "Chemopreventive effects of S-methylcysteine on rat hepatocarcinogenesis induced by concurrent administration of sodium nitrite and morpholine."Cancer Lett.. 161. 97-103 (2000)