ライム病ボレリアの感染トロピズム解明-vls遺伝子群の機能解析-

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12770149
• 研究機関: 国立感染症研究所
• 研究代表者: 川端 寛樹 国立感染症研究所, 細菌部, 研究員 (60280765)
• キーワード: ライム病 / ボレリア / 抗原変換 / vls / 感染トロピズム / 細菌感染症

研究概要

ライム病ボレリアがVMP-like sequence抗原(Vls抗原)を介して特定の宿主細胞(心内膜細胞など)に接着あるいは侵入している可能性を調べるため以下の実験を行った。
<組換体Vlsと宿主組織との相互作用>マウス感染実験によりライム病ボレリア297株の心臓への生着を阻害したVlsタイプ(VlsF16)を、大腸菌バックグラウンドでMalEと融合後、強制発現させ、この組換体タンパク質をカラムで精製した。これをマウスC3H/Heを用い、ボレリア感染マウスおよび健常マウスの心臓の凍結薄切切片を作成、VlsF16-MalE fusion proteinとのインターラクションを共焦点レーザー顕微鏡下で観察した。しかしながら、いずれの切片材料においても、試験品が組織に接着している像は観察されなかった。これは試験に用いた精製品の構造が保たれていないことに起因する可能性が高いと推測した。したがって本年報告されたボレリア形質転換plasmidを、ニューヨーク州立大学から供与を受け、現在これに心臓生着型Vls遺伝子をいれ込み、この遺伝子を欠失させた株を形質転換させ、接着・侵入試験を行うべく準備中である。

研究成果

• [文献書誌] Furuta Y.,Kawabata H.,OhtaniF.,Wotanabe H.: "Western blot analysis of anti Borrelia antibodies in patients with acute peripheral facial palsy in Hokkaido Island,Japan."Laryngoscope. (in press). (2001)
• [文献書誌] Kawabata H.,Dancel LA,Sharon YAMV,Yanagihara Y,Koizumi N.,Wotanabe H.: "flaB-polymerase chain reaction (flaB-PCR) and its restriction fragment length polymorphism (AFLP) analyis are efficient tool for detection and identification of leptospira spp."Microbiology and Immunology. (in press). (2001)