マクロファージの細胞内コレステロール転送に伴うACAT-1細胞内局在変化の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12770637
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 坂下 直実 熊本大学, 医学部, 文部科学教官講師 (90284752)
• キーワード: ACAT / 小胞(vesicle) / 免疫電顕 / マクロファージ / コレステロール / 泡沫化

研究概要

ヒト末梢血単球由来マクロファージの泡沫化におけるアシルコエンザイム A:コレステロールアシルトランスフェラーゼ-1(ACAT-1)の細胞内局在の変化を超微形態レベルにて検討した。培養ヒトマクロファージをアセチル化低密度リポ蛋白(LDL)にて48時間処理すると、細胞の泡沫化とともに本来小胞体に存在するACAT-1が小胞体に由来する小胞構造(vesicle)に移行した。ACAT-1は細胞内に過剰に存在するコレステロールをエステル化することによって、コレステロールの毒性から細胞を保護し、細胞内コレステロールホメオステーシスを維持している。したがって過剰量のコレステロール負荷に伴って出現するACAT-1陽性小胞は、細胞内コレステロール濃度の上昇に伴って、ACAT-1の基質であるコレステロールとACAT-1の接触性(accessibility)を亢進させ、効率的に過剰な細胞内コレステロールをエステル化して細胞内コレステロール濃度を低減させていると考えられる。
マクロファージ泡沫化に伴うACAT-1陽性小胞はヒトマクロファージのみならずマウス腹腔マクロファージにおいても同定できた。また、アセチル化LDLにて処理したマウス腹腔マクロファージは、小胞体からゴルジ体への細胞内輸送小胞の形成を阻害するブレフェルディンAの存在下においても泡沫化した。このことより、過剰の細胞内コレステロール負荷によって生じるACAT-1陽性小胞出現は小胞体→ゴルジ体への小胞輸送経路とは異なったメカニズムにより制御されていると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Chang CCY,Sakashita N, et al.: "Immunological quantitation and localization of ACAT-1 and ACAT-2 in human liver and small intestine."Journal of Biological Chemistry. 275(36). 28083-28092 (2000)
• [文献書誌] Takahashi K,Takeya M,Sakashita N et al.: "The role of macrophage scavenger receptors in atherosclerosis."Seminars in Clinical Immunology. 19(1). 29-38 (2000)
• [文献書誌] Sakashita N et al.: "Acyl Coenzyme A : Cholesterol Acyltransferase (ACAT) in Macrophage-Derived Foam Cells and Its Distribution in Human Organs."Acta Histochemica et Cytochemica. 33(3). 189-194 (2000)
• [文献書誌] Sakashita N et al.: "Familial amyloidotic polyneuropathy (ATTR Ser50lle): the first autopsy case report."Virchows Archivs. 436(4). 345-350 (2000)
• [文献書誌] Yamashita T,Ando Y,Obayashi K,Terazaki H,Sakashita N et al.: "Oxidative injury is present in Purkinje cells in patients with olivopontocerebellar atrophy."Journal of Neurological Science. 175(2). 107-110 (2000)
• [文献書誌] Sakashita N et al.: "Localization of Human Acyl-Coenzyme A : Cholesterol Acyltransferase-1(ACAT-1) in Macrophages and in Various Tissues."American Journal of Pathology. 156(1). 227-236 (2000)