遺伝子欠損マウス病態モデルを用いた複合的IL-1ra機能解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12771466
• 研究機関: 共立薬科大学
• 研究代表者: 飯笹 久 共立薬科大学, 薬学部, 助手 (80306662)
• キーワード: IL-1 receptor antagonist / Th-1 / Th2 / 株化 / 血管周波細胞 / 樹状細胞 / 分化

研究概要

昨年度私は本研究を行うに先立ち、病態成立時に伴う種々の異常を解析し、Interleukin-1,receptor antagonist(IL-1ra)の新たな役割を提示した。本年度まず私はBalb/c背景のIL-1ra欠損マウスにProiponibacterium ances死菌を静脈内投与し、肉芽腫内の樹状細胞の分化を解析した。IL-1ra欠損マウスでは、菌体投与3日目で.は野生型マウスと比較して、肉芽腫の増加と肉芽腫のサイズが大きくなっていた。また免疫染色にて解析した結果、CD11c、F4/80、DEC205陽性細胞は野生型マウスと比較してIL-1ra欠損マウスの肉芽腫中に増加していた。しかしながらCD11c陽性細胞を分離し半定量的RT-PCRにて解析した結果、IL-1ra欠損マウスでは樹状細胞の成熟マーカーの発現量は低下し、逆に未成熟マーカーの発現が著名に増加していた。加えて、サイトカインの産生は主に肉芽周辺のCD4陽性細胞が行っており、Th2型サイトカインとTh1型サイトカインの発現亢進を認めた。従ってこれらのサイトカイン産生異常は、肉芽腫を形成する樹状細胞の分化異常が引きおこしたと思われる。本成果は現在投稿中である。次に私は、IL-1ra遺伝子の導入の効率をあげる道具として、炎症に伴い認められる血管新生に関連する血管局皮細胞株の株化を行った。私は血管周皮細胞株は、毛細血管に存在するがその数は少なく、株化の報告は現在までなかった。まず私は血管周皮細胞が他の組織と比べ、比較的多く存在している脳組織より血管周皮細胞の大量調整法を開発し、引き続き私は温度感受性SV40遺伝子導入ラットの脳毛細血管から、世界で始めて血管周皮細胞株を樹立した。本細胞株に関する報告は、Eur.J.Cell Biol.にて印刷中である。本細胞株をベクターとして用いることで、分泌型IL-1raの炎症局所へのデリバリーが可能になると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] T Asashima, H Iizasa, T Terasaki, K Hosoya, K Tetsuka, M Ueda, M Obinata, E Nagasima: "Newly developed rat brain pericyte cell line, TR-PCT1, responds to transforming growth factor-β1 and β-glycerophosphate"Eur.J.Cell Biol.. (in press). (2002)