2001 年度実績報告書

質量分析法によりDNA多型を検索するDNAチップの開発

研究課題

研究課題/領域番号	12794019
研究機関	東海大学
研究代表者	猪子英俊東海大学, 医学部, 教授 (10101932)
研究分担者	川畑慎一郎島津製作所, 分析機器事業部, プロダクトマネージャー田宮元東海大学, 医学部, 助手 (10317745) 椎名隆東海大学, 医学部, 助手 (00317744)
キーワード	質量分析 / MALDI-TOF / 遺伝子多型 / SNP / HLA / マイクロサテライト / スライドガラス / DNAチップ
研究概要	DNA分子をMALDI-TOF式の質量分析法によって測定する場合、その鎖長が長くなるにつれて検出されるシグナルは微弱になり、感度・分解能の低下が引き起こる。このような理由により、長鎖長(100bp以上)のDNAはもとより、比較的短いDNA鎖であっても2塩基鎖の識別はこれまで非常に困難なものであった。本年度はMALDI TOFMSでマイクロサテライト多型識別を可能にするために必要である、長鎖長DNA(100塩基以上)の測定について、2塩基の差長の違いを安定して検出するための至適条件検討を行った。パラメータとしてはまずはじめに(1)精製法、(2)サンプル濃度、(3)レーザー強度に着目し、詳細に条件を検討した。その結果、100bp程度のDNA鎖について、2塩基差の識別に十分な分解能を得ることが可能となった。また、分子量の高い3〜5塩基繰り返しマイクロサテライトについても、チップ上で質量分析法を用いた分子量測定によって多型性の検索が可能となるように、測定条件を検討している。今年度は、赤外線レーザーによる照射が可能な測定装置の開発を行った。現在、これら諸条件のさらなる検討により、マイクロサテライト多型検索のための質量分析によるDNAチップ法の能力向上に取り組んでいる。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Tsuda et al.: "Phylogenetic analysis of penguin(Spheniscidae) species based on sequence variation in MHC class II genes"Immunogenetics. 53(8). 712-6 (2001)
[文献書誌] Mizuki et al.: "HLA-B*51 allele analysis by the PCR-SBT method and a strong association of HLA-B*5101 with Japanese patients with Behcet's disease"Tissue Antigens. 58(3). 181-4 (2001)
[文献書誌] Romphruk et al.: "Diversity of MICA(PERB11.1) and HLA haplotypes in Northeastern Thais"Tissue Antigens. 58(2). 83-9 (2001)
[文献書誌] Sano et al.: "The absence of disease-specific polymorphisms within the HLA-B51 gene that is the susceptible locus for Behcet's disease"Tissue Antigens. 58(2). 77-82 (2001)
[文献書誌] Seki et al.: "Stratification analysis of MICA triplet repeat polymorphisms and HLA antigens associated with ulcerative colitis in Japanese"Tissue Antigens. 58(2). 71-6 (2001)
[文献書誌] Kulski et al.: "Genomic and phylogenetic analysis of the human CD1 and HLA class I multicopy genes"J Mol Evol.. 53(6). 642-50 (2001)

2001 年度 実績報告書

質量分析法によりDNA多型を検索するDNAチップの開発

研究代表者

猪子 英俊 東海大学, 医学部, 教授 (10101932)

研究成果

[文献書誌] Tsuda et al.: "Phylogenetic analysis of penguin(Spheniscidae) species based on sequence variation in MHC class II genes"Immunogenetics. 53(8). 712-6 (2001)

[文献書誌] Mizuki et al.: "HLA-B*51 allele analysis by the PCR-SBT method and a strong association of HLA-B*5101 with Japanese patients with Behcet's disease"Tissue Antigens. 58(3). 181-4 (2001)

[文献書誌] Romphruk et al.: "Diversity of MICA(PERB11.1) and HLA haplotypes in Northeastern Thais"Tissue Antigens. 58(2). 83-9 (2001)

[文献書誌] Sano et al.: "The absence of disease-specific polymorphisms within the HLA-B51 gene that is the susceptible locus for Behcet's disease"Tissue Antigens. 58(2). 77-82 (2001)

[文献書誌] Seki et al.: "Stratification analysis of MICA triplet repeat polymorphisms and HLA antigens associated with ulcerative colitis in Japanese"Tissue Antigens. 58(2). 71-6 (2001)

[文献書誌] Kulski et al.: "Genomic and phylogenetic analysis of the human CD1 and HLA class I multicopy genes"J Mol Evol.. 53(6). 642-50 (2001)

2001 年度実績報告書

猪子英俊東海大学, 医学部, 教授 (10101932)

[文献書誌] Mizuki et al.: "HLA-B51 allele analysis by the PCR-SBT method and a strong association of HLA-B5101 with Japanese patients with Behcet's disease"Tissue Antigens. 58(3). 181-4 (2001)