2000 年度実績報告書

内分泌かく乱物質による晩発障害発生の分子メカニズムの解析

研究課題

研究課題/領域番号	12836002
研究機関	千葉大学
研究代表者	赤坂武千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40311609)
研究分担者	古関明彦千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (40225446)
キーワード	ポリコーム群 / クロマチン / スプライセオソーム / Hox / Mel18 / Bmi1 / DES
研究概要	ショウジョウバエ・ポリコーム遺伝子群であるMel-18とBmi-1遺伝子産物の機能を分子レベルで明確にしていくことが,本研究の目的であり、それらの作用機序について以下のように解析を行った。 (1)HoxクラスターにおけるMel-18結合領域同定の試み。染色体上のMel-18結合領域を明らかにするために、クロマチンDNAとMel-18の複合体の免疫共沈を試みた。パラフォルムアルデヒドを用いて、マウス11.5日胚を固定し、超音波処理によりクロマチンDNA/Mel-18複合体を可溶化した。約1kBの断片として可溶化する条件を明らかにした。セシウム濃度勾配を用いて、フリーのタンパク、クロマチンDNA/タンパク複合体、フリーのクロマチンDNAを分画したところ、Mel-18とBmi-1とBmi-1遺伝子産物は、クロマチンDNA/タンパク複合体の分画にのみ存在することが明らかになった。これとは対照的に、Mel-18とBmi-1のインターラクターであるRing1Bは、クロマチンに結合している分画だけではなく、結合していない分画にも含まれることが明らかになった。Ring1Bも、Hoxクラスターの転写制御に寄与することを明らかにしているので、クロマチン結合型のRing1Bが、Mel-18とBmi-1と複合体を構成してポリコーム複合体として機能することが示唆された。Mel-18と免疫共沈されてくるクロマチンDNAに含まれるHoxクラスターの頻度をHoxb7/b8/b9に焦点を絞って系統的に検索している。 (2)155kDaスプライセオソーム結合タンパク(SAP155)によるポリコーム複合体機能の調節 Mel-18とRing1Bのインターラクターとして同定したSAP155は、マウス胚においても構成的にMel-18とRing1Bに結合していることが明らかになった。SAP155を欠損したマウスは、8細胞期におこるコンパクションを維持できず、それ以上に発生は進まない。SAP155とMel-18やMph1二重へテロ接合体では、それぞれのへテロ接合体では観察されないホメオチック変異が中軸骨格系で観察された。また、クロマチン結合分画にもSAP155が見られたことから、一部のSAP155はポリコーム複合体のコンポーネントとしても作用する可能性が示された。 (3)DESによるHox発現の変化の検索胎児期にDESを連続投与することにより、子宮においてHox遺伝子発現が誘導されることを明らかにした。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Koizumi,K: "The role of Presenilin 1 during somite segmentation."Development. (In press). (2001)
[文献書誌] Akasaka,T: "Mice doubly deficient for the Polycomb-Groupe genes Mel18 and Bmi1 reveal synergy and requirement for maintenance but not initiation of Hox gene expression."Development. (In press). (2001)
[文献書誌] Fukamachi,H: "Mesenchymal transcription factor FKH6 controls gastric epithelial development and differentiation."BBRC. (In press). (2001)
[文献書誌] Isono,K: "Molecular cloning, genetic mapping, and expression of the mouse Sf3b1 (SAP155) gene for the U2 snRNP component of spliceosome."Mammalian Genome. (In press). (2001)
[文献書誌] Sudo,H: "Inductive signals from the somatopleure mediated by bone morphogenetic proteins are essential for the formation of the sternal component of avian ribs."Dev.Biol.. (In press). (2001)
[文献書誌] Takahashi,Y: "Mesp2 initiates somite segmentation through the Notch signalling pathway."Natue genetics. 25. 390-396 (2000)

2000 年度 実績報告書

内分泌かく乱物質による晩発障害発生の分子メカニズムの解析

研究代表者

赤坂 武 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40311609)

研究成果

[文献書誌] Koizumi,K: "The role of Presenilin 1 during somite segmentation."Development. (In press). (2001)

[文献書誌] Akasaka,T: "Mice doubly deficient for the Polycomb-Groupe genes Mel18 and Bmi1 reveal synergy and requirement for maintenance but not initiation of Hox gene expression."Development. (In press). (2001)

[文献書誌] Fukamachi,H: "Mesenchymal transcription factor FKH6 controls gastric epithelial development and differentiation."BBRC. (In press). (2001)

[文献書誌] Isono,K: "Molecular cloning, genetic mapping, and expression of the mouse Sf3b1 (SAP155) gene for the U2 snRNP component of spliceosome."Mammalian Genome. (In press). (2001)

[文献書誌] Sudo,H: "Inductive signals from the somatopleure mediated by bone morphogenetic proteins are essential for the formation of the sternal component of avian ribs."Dev.Biol.. (In press). (2001)

[文献書誌] Takahashi,Y: "Mesp2 initiates somite segmentation through the Notch signalling pathway."Natue genetics. 25. 390-396 (2000)

2000 年度実績報告書

赤坂武千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (40311609)