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2000 年度 実績報告書

生理活性物質産生腸内フローラによる疾病の予防と治療

研究課題

研究課題/領域番号 12877047
研究機関徳島大学

研究代表者

大西 克成  徳島大学, 医学部, 教授 (10037400)

研究分担者 中山 治之  徳島大学, 医学部, 助手 (80294669)
桑原 知巳  徳島大学, 医学部, 助手 (60263810)
片岡 佳子  徳島大学, 医学部, 助手 (40189303)
有持 秀喜  徳島大学, 医学部, 教務員 (30311822)
キーワード機能性腸内菌 / リコペン産生大腸菌 / ラクトフェリン産生腸内菌 / aberrant crypt foci (ACF) / azoxymethane / プロバイオティクス / ラクトフェリン / Bacteroides uniformis
研究概要

プロバイオティクスの応用として、新世代機能性食品素材の創製を目的とし、抗発癌物質を産生する腸内菌を遺伝子工学的手法を用いて作製し、腸管に定着させることで大腸前癌病変aberrant crypt foci(ACF)形成が抑制されるかどうかを検討し、以下の点を明らかにした。
1.土壌細菌Erwinia uredovora由来のリコペン生合成遺伝子を大腸菌-BacteroidesのシャトルベクターpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVEIBを、大腸菌HB101株に形質転換することでリコペン産生大腸菌HB101(pVEIB)株を作製した。
2.大腸菌HB101(pVEIB)株の菌体懸濁液をF344ラットに飲料水として摂取させたところ、ベクター対照株である大腸菌HB101(pVAL-1)株投与群と比べてazoxymethane(AOM)誘発ACF形成が有意に減少した。
3.ヒト由来ラクトフェリン遺伝子をpVAL-1に導入して得られたプラスミドpVLFKを、Bacteroides uniformis BU1001株に形質転換することでB.uniformis BU1001(pVEIB)株を作製した。900bpのラクトフェリンDNAプローブを用いたノーザンブロットによって2.2kbのラクトフェリンmRNAを、またウサギ抗ヒトラクトフェリン抗体を用いたウエスタンブロットによって80kDaのラクトフェリンタンパク質が合成されていることを確認した。
4.B.uniformis BU1001(pVEIB)株に、大腸菌HB101株に対する増殖抑制作用が認められた。
5.B.uniformis BU1001(pVEIB)株の一夜培養液をF344ラットに飲料水として摂取させたところ、ベクター対照株であるB.uniformis BU1001(pVAL-1)株投与群と比べてAOM誘発ACF形成が有意に減少した。

  • 研究成果

    (6件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (6件)

  • [文献書誌] Chiampanichayakul,S. et al.: "Inhibitory effects of bitter melon (Momordica charantia Linn.) on bacterial mutagenesis and aberrant crypt focus formation in the rat colon."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)

  • [文献書誌] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of herbal teas and herb extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid upon treatment with nitrite in the presence of ethanol."Environ.Mutagen.Res.. 23(in press). (2001)

  • [文献書誌] Kuwahara,T. et al.: "Genetic variation in 16S-23S rRNA internal transcribed spacer regions and the possible use of this genetic variation for molecular diagnosis of Bacteroides species."Microbiol.Immunol.. 45(in press). (2001)

  • [文献書誌] Kuwahara,T. et al.: "PCR-dot blot hybridization based on the neuraminidase-encoding gene is useful for detection of Bacteroides fragilis."J.Med.Invest.. 48(1/2)(in press). (2001)

  • [文献書誌] Chone,Y. et al.: "Low susceptibility of Long-Evans Cinnamon rats to N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine-induced urinary bladder carcinogenesis and inhibitory effect of urinary copper."Jpn.J.Cancer Res.. 91. 16-24 (2001)

  • [文献書誌] Higashimoto,M. et al.: "Inhibitory effects of tea extracts on the mutagenicity of 1-metyl-1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid on treatment with nitrite in the presence of ethanol."Food Chem.Toxicol.. 38. 7-13 (2000)

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公開日: 2002-04-03   更新日: 2016-04-21  

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