2000 年度実績報告書

サイクロスポリンAとFK506の新たな標的

研究課題

研究課題/領域番号	12877056
研究機関	慶應義塾大学
研究代表者	小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)
キーワード	免疫抑制剤 / カルシニューリン / JNK / p38 / インターロイキン2 / NF-AT
研究概要	免疫抑制剤であるサイクロスポリンA(CsA)やFK506はセリン・スレオニン脱リン酸化酵素であるカルシニューリン(Cn)の酵素活性を抑制する。従来Cnの抑制のみがCsAやFK506の作用機序と考えられてきた。我々はT細胞受容体とCD28の共受容体の刺激によって活性化されるMAPキナーゼファミリーのJNKやp38の活性化もCsAやFK506によって抑制されることを見いだした。一方、CsAやFK506は高浸透圧や薬剤によるストレスに伴って活性化されるJNKやp38は抑制しない。これらの事実はT細胞活性化に特異的なJNKやp38の活性化経路もCsAやFK506の標的であることを示唆する。そこで、この経路の分子的基盤を明らかにするための第一歩として、Cnの活性化経路を恒常的に活性化し、JNKやp38の活性化経路のみを検討できる系の開発しを試みた。そのために、Cnの基質でありかつT細胞活性化の最終標的遺伝子の一つであるインターロイキン2(IL-2)の転写に必須のNF-ATタンパク質の恒常活性型変異体を作製した。NF-ATはN端側にリン酸化を受けることによって細胞質内にとどまり、Cnによって脱リン酸化を受けると核内へ移行する。そこでリン酸化部位を含むN端側を欠失した変異体を作製したところ、変異体は恒常的に核内にとどまり、さらに転写活性も持つことが明らかになった。恒常活性型NF-ATを発現するT細胞に刺激を与えてIL-2プロモーターの活性化を検討したところ、やはりCsAやFK506がJNKやp38の活性化ならびにIL-2プロモーターの活性化を阻害することが明らかになった。これらの実験結果はCn/NF-AT経路とは独立にCsAやFK506の標的が存在することを強く示す。現在さらにその標的を同定すべく検討を重ねている。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses."J.Immunol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Expression of functional IL-2 receptors on mature splenic dendritic cells."Eur.J.Immunol.. 30. 1453-1457 (2000)
[文献書誌] Fukao,TY., et al.: "Synergistic effects of IL-4 and IL-18 on IL-12 dependent interferon-γ production by dendritic cells."J.Immunol.. 164. 64-71 (2000)
[文献書誌] Amagai,M., et al.: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model. "J.Clin.Invest.. 105. 625-631 (2000)
[文献書誌] Andjelic,S., et al.: "Phosphatidylinositol 3-kinase and NF-κB/Rel are at the divergence of CD40-mediated proliferation and survival pathways."J.Immunol.. 165. 3860-3867 (2000)
[文献書誌] Proby,C.M., et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris."Br.J.Dermatol.. 142. 321-330 (2000)
[文献書誌] Ohteki,T., et al.: "Interleukin-12 dependent interferon-γ production by CD8α^+ lymphoid dendritic cells."J.Exp.Med.. 189. 1981-1986 (1999)

2000 年度 実績報告書

サイクロスポリンAとFK506の新たな標的

研究代表者

小安 重夫 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)

研究成果

[文献書誌] Toyama-Sorimachi,N., et al.: "Mouse CD94 participates in Qa-1-mediated self recognition by NK cells and delivers inhibitory signals independent of Ly-49."J.Immunol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Inducible expression of Stat4 in dendritic cells and macrophages and its critical role in innate and adaptive immune responses."J.Immunol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Fukao,T., et al.: "Expression of functional IL-2 receptors on mature splenic dendritic cells."Eur.J.Immunol.. 30. 1453-1457 (2000)

[文献書誌] Fukao,TY., et al.: "Synergistic effects of IL-4 and IL-18 on IL-12 dependent interferon-γ production by dendritic cells."J.Immunol.. 164. 64-71 (2000)

[文献書誌] Amagai,M., et al.: "Use of autoantigen knockout mice to develop an active autoimmune disease model. "J.Clin.Invest.. 105. 625-631 (2000)

[文献書誌] Andjelic,S., et al.: "Phosphatidylinositol 3-kinase and NF-κB/Rel are at the divergence of CD40-mediated proliferation and survival pathways."J.Immunol.. 165. 3860-3867 (2000)

[文献書誌] Proby,C.M., et al.: "Development of chimeric molecules for recognition and targeting of antigen-specific B cells in pemphigus vulgaris."Br.J.Dermatol.. 142. 321-330 (2000)

[文献書誌] Ohteki,T., et al.: "Interleukin-12 dependent interferon-γ production by CD8α^+ lymphoid dendritic cells."J.Exp.Med.. 189. 1981-1986 (1999)

2000 年度実績報告書

小安重夫慶應義塾大学, 医学部, 教授 (90153684)