| 研究課題/領域番号 |
12877100
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| 研究機関 | 川崎医科大学 |
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研究代表者 |
砂田 芳秀 川崎医科大学, 医学部, 教授 (00240713)
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| 研究分担者 |
原 賢治 川崎医科大学, 医学部, 講師 (50198884)
大沢 裕 川崎医科大学, 医学部, 講師 (80246511)
村上 龍文 川崎医科大学, 医学部, 講師
松村 喜一郎 帝京大学, 医学部, 助教授 (50260922)
柴田 明徳 川崎医科大学, 医学部, 助手 (50248209)
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| キーワード | 若年性パーキンソン病 / パーキン(parkin) / アポトーシス |
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| 研究概要 |
parkinは常染色体劣性若年性パーキンソン症候群(AR-JP)の原因タンパクである。parkinの生理機能の解明はパーキンソン病の病態理解、すなわち黒質ドーパミンニューロンの選択的細胞死の分子メカニズムを知る上で重要である。最近、parkinがユビキチンリガーゼ活性を持ち、ユビキチン-プロテアソーム系のタンパク分解にかかわることが示された。われわれは、full-lengthのparkinが神経細胞や筋細胞など寿命の長い細胞に優位に発現し、一方リンパ球など寿命の短い細胞ではexon 3-5を欠くtranscriptが検出されたことから、parkinはアポトーシス抑制タンパクであるとの作業仮説を考え、それを検証しするため、以下の研究を行った。
(1)U937細胞培養系にカンプトテシンを添加しアポトーシスを誘導する系を用いてアポトーシス誘発の前後で、parkinの発現量やtranscriptの種類がどのように変化するかRT-PCRで検討した。その結果、アポトーシス前後でparkinの発現量やsplicingには変化がみられなかった。
(2)BHK細胞にそれぞれ正常なfull-length parkinとexon 3-5欠失parkinを過剰強制発現させてアポトーシスが誘発されるか検討した。両者ともアポトーシスの誘導は観察されなかった。しかし、exon 3-5欠失parkinを発現させた細胞では細胞質内に変異parkinタンパクの凝集塊が形成されるのが観察された。parkin遺伝子変異によるloss of functionがParkinson病発症に関与することから、今後はparkinのアンチセンスノックアウトによりアポトーシスが誘発されるか培養細胞系を用いて検討する。
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