NK3受容体プローブの創製とGnRHパルス発生機構の解明

2014 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12J06309
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 三須 良介 京都大学, 薬学研究科, 特別研究員(DC1)
• キーワード: GnRH / NK3受容体 / senktide / ネプリライシン / ペプチドミメティクス / MUAボレー / GPR54 / 光アフィニティープローブ

研究実績の概要

平成25年度に見出したペプチダーゼ耐性を有するNK3受容体アゴニストのin vivoにおける生物活性評価を、卵巣摘出ヤギのMUAボレーを指標として共同研究により実施した。その結果、本ペプチドが既知NK3受容体選択的アゴニストであるsenktideに比べて高い持続性を示すことを見出した。本検討により見出された新規NK3受容体アゴニストペプチドは、GnRHパルス発生機構の解明に向けた新たなツールとしての利用が期待される。
続いて、平成25年度に新たに見出した新規高活性NK3受容体選択的アゴニストについて、生体試料中における分解特性を解析した。その結果、senktideのN末端アミノ酸をD-グルタミン酸に置換することで、ペプチダーゼ耐性が向上することを見出した。一方、本ペプチドのin vivoにおける作用時間はsenktideと同等にとどまったことから、ペプチドのペプチダーゼ耐性はin vivoにおける作用持続時間と直接相関しないことが示唆された。本検討結果は、長時間作用型NK3受容体アゴニストの創製に向けて重要な知見を与えるものと考えられる。
また、生体内でのGPR54の局在解析、及び、キスペプチン類の標的探索を目的として、ラットキスペプチン(rKp-14)の配列に基づき、4種類の光アフィニティープローブを設計・合成した。合成したプローブはいずれもGPR54に対するアゴニスト活性を維持した。一方、GPR54発現細胞より調製した膜画分に対して光親和性ラベル化実験を実施したところ、受容体の標識には高濃度のプローブを要することが判明したことから、標識における特異性と結合親和性の向上が今後必要であることが示唆された。

現在までの達成度 (段落)

26年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

26年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Structure-activity relationship study on senktide for development of novel potent neurokinin-3 receptor selective agonists. (2015)
  • 著者名/発表者名: Misu R, Yamamoto K, Yamada A, Noguchi T, Ohno H, Yamamura T, Okamura H, Matsuda F, Ohkura S, Oishi S, Fujii N.
  • 雑誌名: MedChemCommun 巻: 6 ページ: 469-476
  • DOI: 10.1039/C4MD00514G
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a novel neurokinin-3 receptor selective agonist with highly biological stability. (2015)
  • 著者名/発表者名: Misu R, Oishi S, Yamada A, Yamamura T, Matsuda F, Yamamoto K, Noguchi T, Ohno H, Okamura H, Ohkura S, Fujii N.
  • 雑誌名: Peptide Science 2014 ページ: 23-24
  • 査読あり
• [雑誌論文] Optimization of neurokinin-3 receptor (NK3R)-selective agonists. (2015)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto K, Oishi S, Misu R, Noguchi T, Ohno H, Yamamura T, Okamura H, Matsuda F, Ohkura S, Fujii N.
  • 雑誌名: Peptide Science 2014 ページ: 241-242
  • 査読あり
• [雑誌論文] Identification of novel CXCR7 selective ligands with cyclic pentapeptide scaffold. (2015)
  • 著者名/発表者名: Kuroyanagi T, Oishi S, Kubo T, Kobayashi Y, Misu R, Ohno H, Montpas N, Heveker N, Yoshikawa Y, Furuya T, Fujii N.
  • 雑誌名: Peptide Science 2014 ページ: 147-148
  • 査読あり
• [雑誌論文] Optimization of diaryl amine derivatives as kinesin spindle protein inhibitors. (2014)
  • 著者名/発表者名: Takeuchi T, Oishi S, Kaneda M, Misu R, Ohno H, Sawada J, Asai A, Nakamura S, Nakanishi I, Fujii N.
  • 雑誌名: Bioorg. Med. Chem. 巻: 22 ページ: 3171-3179
  • DOI: 10.1021/m1500016j
  • 査読あり
• [雑誌論文] Design and synthesis of fluorescent probes for GPR54. (2014)
  • 著者名/発表者名: Kaneda M, Misu R, Ohno H, Hirasawa A, Ieda N, Uenoyama Y, Tsukamura H, Maeda K, Oishi S, Fujii N.
  • 雑誌名: Bioorg. Med. Chem. 巻: 22 ページ: 3325-3330
  • DOI: 10.1016/j.bmc.2014.04.052
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis of IB-01212 by multiple N-methylations of peptide bonds. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nabika R, Oishi S, Misu R, Ohno H, Fujii N.
  • 雑誌名: Bioorg. Med. Chem. 巻: 22 ページ: 6156-6162
  • DOI: 10.1016/j.bmc.2014.08.036
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of novel neurokinin 3 receptor (NK3R) selective agonists with resistance to proteolytic degradation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Misu R, Oishi S, Yamada A, Yamamura T, Matsuda F, Yamamoto K, Noguchi T, Ohno H, Okamura H, Ohkura S, Fujii N.
  • 雑誌名: J. Med. Chem. 巻: 57 ページ: 8646-8651
  • DOI: 10.1021/jm500771w
  • 査読あり
• [雑誌論文] Synthesis and biological evaluation of the [D-MeAlall]-epimer of coibamide A. (2014)
  • 著者名/発表者名: Nabika R, Suyama TL, Hau AM, Misu R, Ohno H, Ishmael JE, McPhail KL, Oishi S, Fujii N.
  • 雑誌名: Bioorg. Med. Chem. Lett. 巻: 25 ページ: 302-306
  • DOI: 10.1016/j.bmcl.2014.11.044
  • 査読あり
• [学会発表] Development of novel neurokinin-3 receptor selective agonists with resistance against proteolytic degradation. (2014)
  • 著者名/発表者名: Misu R, Oishi S, Yamada A, Yamamura T, Matsuda F, Yamamoto K, Noguchi T, Ohno H, Okamura H, Ohkura S, Fujii N.
  • 学会等名: 第51回ペプチド討論会
  • 発表場所: 徳島大学(徳島県徳島市)
  • 年月日: 2014-10-22
• [学会発表] ペプチダーゼ耐性を有する新規NK3受容体アゴニストの創製研究 (2014)
  • 著者名/発表者名: 三須良介、大石真也、山田愛、山本昂輝、野口太朗、大野浩章、山村崇、岡村裕昭、松田二子、大蔵聡、藤井信孝
  • 学会等名: 第8回ケミカルバイオロジー学会年会
  • 発表場所: 大阪大学(大阪府豊中市)
  • 年月日: 2014-06-13
• [学会発表] NK3受容体アゴニストの生体内安定性評価と新規誘導体の創製 (2014)
  • 著者名/発表者名: 三須良介、大石真也、山田愛、山本昂輝、野口太朗、大野浩章、山村崇、岡村裕昭、松田二子、大蔵聡、藤井信孝
  • 学会等名: 第11回GPCR研究会
  • 発表場所: 日本科学未来館(東京都江東区)
  • 年月日: 2014-05-09
• [備考] 所属研究室ホームページ
  • URL: http://www.pharm.kyoto-u.ac.jp//seizo/
• [産業財産権] 新規NK3受容体アゴニスト (2014)
  • 発明者名: 藤井信孝、大野浩章、大石真也、三須良介、山田愛、山本昂輝、岡村裕昭、山村崇
  • 権利者名: 京都大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: PCT/JP2014/82217
  • 出願年月日: 2014-12-05
  • 外国