| 研究概要 |
CRM1は,代表的な核外輸送受容体(exportin)であり,Leu-rich nuclear export signal(NES)をもつさまざまな輸送基質(cargo;転写因子などの蛋白質や,リボソームなどのRNA-蛋白質複合体)を認識して核から細胞質に運び出す。これまでの構造解析研究により,CRMIによる輸送の方向性制御機構の鍵を握る「核内でCRM1とNESの結合がRanGTP(核に局在する)に依存する機構」と,「細胞質でRanBP1(細胞質に局在する)によりNESのCRM1からの解離が促進される機構」の構造基盤の理解が大きく進んだ。しかし,核外輸送受容体CRM1が如何にして核膜孔を通過するのかという点については,最大の未解明課題として残されている。本研究では,この「CRM1核外輸送複合体が核膜孔を通過する機構」を解明するための構造研究に取り組んだ。CRM1核外輸送複合体が核膜孔を通過するためには,CRM1と核膜孔複合体構成蛋白質群(Nup)との相互作用が重要である。本研究ではNupの一種について,CRM1とcargo,RanGTP,Nupから成る四者複合体の結晶化に成功し,高分解能で構造を解くことができた。これは,CRM1とNupの相互作用様式を原子レベルで明らかにした世界初の構造であり,これまでに解かれた結晶構造との比較により,CRM1核外輸送におけるNupの作用機序に関して興味深い知見を与えるものであった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
CRM1は高分解能まで回折する単結晶を作製するのが難しく,また本研究では4つの蛋白質からなる複合体をターゲットとするため,複合体の大量精製と質の良い結晶の調製は困難を極めると予想されたが,高分解能まで回折する結晶を作製することに成功し,構造を解くことができた。
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