微生物成分が誘導するヒト樹状細胞遺伝子群の網羅的解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13206086
• 研究機関: 大阪府立成人病センター研究所
• 研究代表者: 瀬谷 司 大阪府立成人病センター, 研究所, 所長 (10301805)
• 研究分担者: 松本 美佐子 大阪府立成人病センター, 研究所・免疫学部門, 主任研究員 (30332456)
• キーワード: 微生物成分 / 樹状細胞 / ジーンプロファイリング / Toll-like receptor / ウイルス感染 / dsRNA / 細菌感染 / peptidoglycan

研究概要

TLR3がウイルスのdsRNAをPAMPとして認識し、type 1 IFNを誘導することが判明した。一方、TLR2,TLR4は主にNK-kB/p38 MAPKを活性化する。両者の相違をDNA chip, cDNA subtractionなどの解析法で各種感染に応じた樹状細胞の応答の相違として網羅的にデータベース化することを企画している。以下の成果をえている
1.ヒトTLR1,TLR2,TLR3,TLR6,の抗体を作製した。TLR4の抗体は三宅博士(東大医科研)より入手した。各TLRの相互関係とリガンド応答性の機能解析中である。これらの抗体でヒト樹状細胞を検討した。樹状細胞にはTLR3を多く発現するpopulation, TLR2・4を多く発現するpopulationが存在し、subset-specificのTLR発現プロフィールが示唆された。この結果は樹状細胞が一様の細胞群ではなく、微生物認識において多様性をもつsubsetsの集合であること、RT-PCRなど従来の報告は蛋白発現と相違していることを示唆した。
2.HEK293 cellを用いたreporter gene assayでTLR2/4はNFkB,MAPKのpathwayを優位に活性化した。一方、TLR3はPKR pathwayを活性化した。PAMP/TLRの組み合わせで活性化経路が異なることが示された。
3.個体差についてgene chipで解析を開始した。まだcluster解析、profiling解析を開始した時点なので、個体差を議論できるまでに至っていない。疾患別の樹状細胞応答は次年度の目標とする予定である。

研究成果

• [文献書誌] Inoue, N., A.Fukui, M.Nomura, M.Matsumoto, K.Toyoshima, T.Seya.: "A novel chicken membrane-associated complement-regulatory protein : Molecular cloning and functional characterization of a chicken membrane SCR protein"J.Immunol. 166. 424-431 (2001)
• [文献書誌] Nishiguchi, M., M.Matsumoto, T.Takao, M.Hoshino, Y.Shimonishi, S.Tsuji, N.A.Begum, O.Takeuchi, S.Akira, K.Toyoshima, T.Seya.: "Mycoplasma fermentans lipoprotein M161Ag-induced cell activation is mediated by Toll-like receptor 2 : Role of N-terminal hydrophobic portion in its multiple functions"J.Immunol. 166. 2610-2616 (2001)
• [文献書誌] Seya T(out of 96 authors) et al.: "The RIKEN Genome Exploration Research Group Phase II Team and the FANTOM Consortium. Functional annotation meeting"Nature. 409. 685-690 (2001)
• [文献書誌] Nomura, M., K.Matsumiya, M.Kitamura, A.Okuyama, M.Matsumoto, K.Toyoshima, T.Seya.: "Gnomic analysis of ideopathic infertile patients with sperm-specific depletion of CD46"Exp.Clin.Immunogen. 18. 42-50 (2001)
• [文献書誌] Kikkawa, S., M.Matsumoto, K.Shida, Y.Fukumori, K.Toyoshima, T.Seya: "Human macrophages produce dimeric forms of IL-18 which can be detected with monoclonal antibodies specific for inactive IL-18"Biochem.Biophys.Res.Commun. 281. 461-467 (2001)
• [文献書誌] Shida, K, M.Matsumoto, S.Kikkawa, H.Okamura, S.Tsuji, Y.Fukumori, K.Toyoshima, T.Seya.: "An alternative form of human IL-18 in human blood plasma : complex formation with IgM defined by monoclonal antibodies"J.Immunol. 166. 6671-6679 (2001)
• [文献書誌] Azuma, I., T.Seya.: "Cell wall skeleton of BCG : application to adjuvant immunotherapy for cancer(Review)"Int.Immunopharmacology. 1. 1249-1259 (2001)
• [文献書誌] Matsumoto, M., T.Seya, S.Kikkawa, S.Tsuji, K.Shida, M.Nomura, M.Kurita-Taniguchi, M.Higashiyama, H.Ohigashi, H.Yokouchi, H.Takami, A.Hayashi, I.Azuma, T.Masaoka, K.Kodama, K.Toyoshima: "Interferon gamma-producing ability in blood lymphocytes of patients with lung cancer through activation of the innate immune system by BCG-cell wall skeleton"Int.Immunopharmacology. 1. 1559-1569 (2001)
• [文献書誌] Moriwaki, Y., N.A.Begum, M..Kobayashi, M.Matsumoto, K.Toyoshima, T.Seya: "Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guerin and its cell wall complex induce a novel lysosomal membrane protein, SIMPLE, that bridges the missing link between lipopolysaccharide and p53-inducible gene, LITAF(PIG7), and estrogen-inducible gene,EET-1"J.Biol.Chem. 276. 23065-23076 (2001)
• [文献書誌] Tsuji, S., J.Uehori, M.Matsumoto, Y.Suzuki, A.Matsuhisa, K.Toyoshima, T..Seya: "Human intelectin is a novel soluble lectin that recognizes galactofranose in carbohydrate chains of bacterial cell wall"J.Biol.Chem. 276. 23456-23463 (2001)
• [文献書誌] Fukui, A., N, Inoue, M.Matsumoto, M.Nomura, Y, Matsuda, K.Toyoshima, T.Seya.: "Molecular cloning and functional characterization of chicken Toll-like receptors : a single chicken Toll covers multiple molecular patterns"J.Biol.Chem.. 276. 47143-47149 (2001)
• [文献書誌] Shiratori, I., S.Tsuji, M.Matsumoto, M.Nomura, K.Toyoshima, T.Seya.: "Molecular cloning and functional characterization of guinea pig IL-12"Int.Immunol. 13. 1129-1139 (2001)
• [文献書誌] Seya, T., M.Matsumoto, S.Tsuji, N.A.Begum, M.Nomura, I.Azuma, A.Hayashi, K.Toyoshima.: "Two receptor theory in innate immune activation : studies on the receptors for bacillus Culmet Guillen-cell wall skeleton (BCG-CWS)"Arch.Immunol.Ther.Exp.. 49 Suppl. 13-21 (2001)
• [文献書誌] Shida K., H.Koizumi, M.Matsumoto, I.Shiratori, S.Kikkawa, S.Tsuji, N.A.Begum, K.Toyoshima, T.Seya: "High serum levels and additional species of IL-18 may participate in suppressing IgE levels in patients with atopic dermatitis"Immunol.Lett.. 79. 169-175 (2001)
• [文献書誌] Soldan S.S., A.Fogdell-Hahn, M.B.Brennan, B.B.Mittleman, L.Massacesi, T.Seya, S.Jacobson.: "Elevated serum and CSF levels of soluble HHV-6 cellular receptor, membrane cofactor protein(MCP ; CD46), in patients with multiple sclerosis"Ann.Neurol.. 50. 486-493 (2001)
• [文献書誌] Seya T., M.Matsumoto, I.Shiratori, Y.Fukumori, K.Toyoshima: "Protein polymorphism of human IL-18 identified by monoclonal antibodies"Int.J.Molec.Med. 8. 585-590 (2001)
• [文献書誌] Koizumi, H., K.Sato-Matsumura, H.Nakamura, K.Shida, S.Kikkawa, M.Matsumoto, K.Toyoshima, T.Seya.: "Distribution of IL-18 and IL-18 receptor in human skin : various forms of IL-18 are produced in keratinocytes"Arch.Dermatol.Res.. 293. 325-333 (2001)
• [文献書誌] Tsujimura, A, K.Nunoue, N.Inoue, K.Shida, M.Kurita-Taniguchi, M.Matsumoto, M.Nomura, T.Takeya, T.Seya.: "Three soluble form messages of murine CD46 are produced by alternative mRNA splicing"J.Biochem. 130. 841-848 (2001)