| 研究概要 |
本年度は、脳由来神経栄養因子(BDNF)、ニューロトロフィン-3(NT-3)、PACAP(Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide)遺伝子のカルシウム(Ca^<2+>)シグナル応答に関わる転写制御系の解析を主に行った。
1.BDNF遺伝子プロモーターl(BDNF-Pl)の解析
ラット大脳皮質初代神経細胞培養系におけるDNAトランスフェクション実験によって、-80〜-90に存在する領域が大きくカルシウム応答に関係していた。この領域には、CREとUSF-1,-2(Upstrem stimulating factor-1,-2)の結合するサイトがオーバーラップして存在し、それぞれがBDNF-Pl活性化に関与していることが認められた。また、カルシウムシグナルによるUSFのリン酸化も認められた。
2.NT-3遺伝子プロモーターの解析
-100より下流に存在するGC-boxが基本的転写活性に寄与しており、これはtandem repeatsの形で機能していることが明らかとなった。
3.PACAPプロモーターの解析
-200付近のCREを含む領域がCa^<2+>応答性に大きく効いていることが確認された。
4.新たなカルシウム応答遺伝子の検索
VIP(Vasoactive intestinal polypeptide)遺伝子がCa^<2+>流入に応答して活性化されることが明らかとなった。
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