2002 年度実績報告書

Parkin遺伝子の変異分析とParkin蛋白の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号	13210122
研究機関	順天堂大学
研究代表者	水野美邦順天堂大学, 医学部, 教授 (30049043)
研究分担者	服部信孝順天堂大学, 医学部, 講師 (80218510)
キーワード	パーキンソン病 / 家族性パーキンソン病 / パーキン / 発症機序 / 神経細胞死 / CDCrel-1
研究概要	パーキン蛋白はUbiqutin ligaseでことが明らかにされている.従って,劣性遺伝性パーキンソン病ではloss-of-function的にUbiqutin ligase活性が低下或いは消失し,パーキン蛋白の基質が分解されずに蓄積することで神経細胞死が起こると推定される.我々はシナプス小胞上に存在するパーキン蛋白の特性を考え同じようにシナプス小胞上に存在するCDCrel-1に注目し,パーキン蛋白のexocytosisへの効果を検討した.ハムスターinsulinoma由来HIT-T15細胞を使い,ヒトGrowth Hormoneをtracerに野生型,変異型パーキン蛋白のexocytosisへの効果を検討した.結果はT415Nの変異パーキン蛋白は濃度依存性にexocytosisを抑制した.このことはパーキン蛋白がexocytosisに影響を与えていることを示す. 次にParkin全長にたいするantisense adeno virusを作成しretinoic acidにより分化誘導したヒトneuroblastoma cellに感染させ,内因性のParkin proteinのknock down解析を行った.感染した細胞は,adeno virus titer依存的にviabilityの低下を認めた.Viabilityの低下した細胞はTUNEL陽性でありCaspase9,3,6,7の活性化が認められapoptosisであることが証明された.またNeuroblastoma細胞以外のヒト由来の細胞系では同様の結果は認めなかった.Knock downによるapoptosisは神経系の培養細胞に特異的であり,またapoptosis signalはmitochondriaに由来しており細胞死の原因がmitochondriaの機能不全に起因するものであることが推測される.

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Kobayashi H, et al.: "Haploinsufficiency at the a-synuclein gene underlies phenotypic severity in familial Parkinson's disease"Brain. (in press). (2003)
[文献書誌] Mori H, et al.: "Genotype-Phenotype Correlation: Familial Parkinson Disease"Neuropathology. (in press). (2003)
[文献書誌] Takanashi M, et al.: "Expression patterns of tau mRNA isoforms correlate with susceptible lesions in progressive supranuclear palsy and corticobasal degeneration"Mol Brain Res. (in press). (2003)
[文献書誌] Schlossmacher MG et al.: "Parkin localizes to the lewy bodies of Parkinson disease and dementia with lewy bodies"Amer J Pathol. 166. 1655-1667 (2002)
[文献書誌] Suzuki A et al.: "Feasibility of ex vivo gene therapy for neurological disorders using the new retroviral GCDNsap packaged in the vesicular stomatitis virus G protein"J Neurochem. 82. 953-960 (2002)
[文献書誌] Tanaka R et al.: "Induction of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) expression in rat brain after focal ischemia/reperfusion"J Cereb Blood Flow Metab. 22. 280-288 (2002)

2002 年度 実績報告書

Parkin遺伝子の変異分析とParkin蛋白の機能解析

研究代表者

水野 美邦 順天堂大学, 医学部, 教授 (30049043)

研究成果

[文献書誌] Kobayashi H, et al.: "Haploinsufficiency at the a-synuclein gene underlies phenotypic severity in familial Parkinson's disease"Brain. (in press). (2003)

[文献書誌] Mori H, et al.: "Genotype-Phenotype Correlation: Familial Parkinson Disease"Neuropathology. (in press). (2003)

[文献書誌] Takanashi M, et al.: "Expression patterns of tau mRNA isoforms correlate with susceptible lesions in progressive supranuclear palsy and corticobasal degeneration"Mol Brain Res. (in press). (2003)

[文献書誌] Schlossmacher MG et al.: "Parkin localizes to the lewy bodies of Parkinson disease and dementia with lewy bodies"Amer J Pathol. 166. 1655-1667 (2002)

[文献書誌] Suzuki A et al.: "Feasibility of ex vivo gene therapy for neurological disorders using the new retroviral GCDNsap packaged in the vesicular stomatitis virus G protein"J Neurochem. 82. 953-960 (2002)

[文献書誌] Tanaka R et al.: "Induction of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) expression in rat brain after focal ischemia/reperfusion"J Cereb Blood Flow Metab. 22. 280-288 (2002)

2002 年度実績報告書

水野美邦順天堂大学, 医学部, 教授 (30049043)