活性酸素種による細胞死誘導と腫瘍細胞での解除機構の解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13214059
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 松村 到 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00294083)
• 研究分担者: 柴山 浩彦 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員 ; 金倉 譲 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20177489)
• キーワード: ROS / NF-κB / MnSOD / c-myc / E2F1

研究概要

本研究では細胞周期制御とアポトーシスの関連をc-myc、E2F1、cyclin D1を過剰発現させた繊維芽細胞株NIH3T3、骨髄性細胞株M1を用いて解析した。
c-myc、E2F1を過剰発現させたNIH3T3はMockのクローンと比較すると血清除去によるアポトーシスに高い感受性を示した。これらのクローンではMockのクローンと異なり血清存在下でも活性酸素種(ROS)が蓄積し、血清除去した際、Mockのクローンと比較してより多くのROSが蓄積した。MnSODの過剰発現やカタラーゼ処理によりROSを消去するとアポトーシス感受性亢進が解除され、このアポトーシス感受性亢進にはROSが関与すると考えられた。また、Mockのクローンでは血清を除去した際、ROSによってNF-kBが活性化されMnSODの発現が誘導されたが、c-myc、E2Fを過剰発現させたクローンではE2F1がNF-kBのsubunit p65に結合し機能的なNF-kB(P65とP50のヘテロダイマー)の形成を阻害するためMnSODの発現誘導が阻害されていた(Molecular Cell, in press)。
M1はIL-6に反応してアポトーシスに陥るが、E2F1、cyclin D1を過剰発現させたM1は、Mockのクローンと比較して高いアポトーシス感受性を示した。M1においてもE2F1、cyclin D1の過剰発現はROSを蓄積させ、IL-6添加後Mockのクローンと比較するとより多くのROSが蓄積した。E2F1、cyclin D1を過剰発現するM1では、NIH3T3の場合と同様に、NF-κBの機能が抑制されていたが、MnSODの発現は阻害されていなかった。この結果から、M1ではNF-κB以外の分子もMnSODの発現を制御していると考えられた。現在、これらのクローンにおけるMnSODの発現誘導機構及びc-myc、E2F1によるROSの蓄積機構を検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Kawasaki, A., et al.: "Down-regulation of an AIM-1 kinase couples with megakaryocytic polyploidization of human hematopoietic cells"J. Cell. Biol.. 152. 275-288 (2001)
• [文献書誌] Tanaka, H., et al.: "E2F-1 and c-Myc potentiate apoptosis through inhibition NF-κB activitiy that facilitates MnSOD-mediated ROS elimination"Molecular Cell. (in press).
• [文献書誌] Ueda, S., et al.: "Critical roles of c-kit tyrosine residues 567 and 719 in stem cell cell factor-induced chemotaxis : contribution of src family kinase and PI3-kinase on calcium mobilization and cell migration"Blood. (in press).
• [文献書誌] Sonoyama, J., et al.: "Functional cooperation among Ras, STAT5 and PI3-K is required for full oncogenic activities of BCR/ABL in K562 cells"J. Biol. Chem.. (in press).
• [文献書誌] Matsumura, I., et al.: "Molecular control of megakaryopoiesis and thrombopoiesis"Int. J. Hematol.. (in press).
• [文献書誌] Matsumura, I., et al.: "Molecular mechanisms of megakaryopoiesis and thrombopoiesis and their dysregulation in hematologic disorders"Res. Adv. in Blood. (in press).