リンパ球性白血病に於けるウイルス蛋白によるセレクチンリガンド合成酵素の転写調節

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13214122
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 平岩 望 愛知県がんセンター, 分子病態学部, 主任研究員 (70175553)
• 研究分担者: 神奈木 玲児 愛知県がんセンター, 分子病態学部, 部長 (80161389)
• キーワード: セレクチンリガンド / fucosyltransferase VII / Tax蛋白 / CRE / T-box / One-hybrid法 / CREB / ATF / F7CAF-1

研究概要

セレクチンリガンド合成糖転移酵素Fuc-T VII遺伝子のヒト成人T細胞白血病ウィルスHTLV-1 Tax蛋白により活性化されるpromoter領域内のenhancer部(CRE-like)にGel Shift AssayによりbZIP型転写因子以外に他の因子との相互作用を認め、酵母One-Hybrid法により既知のCREB/ATF転写因子と同時に、このenhancer部につながる新規のT-box型の転写因子(hF7CAF-1と命名)をクローニングした。このhF7CAF-1はJurkat T細胞にてFuc-T VII遺伝子転写活性を増大し、Taxによる活性化に対し相乗作用も認めた。さらにその効果の機構を解析するためにタグをつけた融合蛋白hF7CAF-1発現ベクターを用いin vivoでの他の因子との関連を検討したところ、Tax及びCREB-1と免疫沈降し相互作用の存在を確認した。またこの転写因子の組織別の発現パターンの検討のためNorthern blotにて解析したところhF7CAF-1はFuc-T VIIと比べ、正常組織での転写発現部位が末梢リンパ球、骨髄などで一致しており、また培養細胞株での検討でもHTLV-1感染T細胞株や刺激後のJurkat T細胞での発現増大を認め、Fuc-T VII遺伝子の発現に強い相関を示した。特に、metallothionein promoterによるTax発現誘導可能なJurkat T細胞(JPX-9細胞)でのTax発現に伴いFuc-T VII、hF7CAF-1遺伝子ともに強く転写誘導されており、Taxによる転写活性化機構に明らかに依存していることが示された。

研究成果

• [文献書誌] Uchimura, K., et al.: "Specificities of N-acetylglucosamine-6-O-sulfotransferases in relation to L-selectin ligand synthesis and tumor-associated enzyme expression"J. Biol. Chem.. 277. 3979-3984 (2002)
• [文献書誌] Kontani, K., et al.: "Modulation of MUC1 mucin as an escape mechanism of breast cancer cells from autologous cytotoxic T-lymphocytes"Br. J. Cancer. 84. 1258-1264 (2001)
• [文献書誌] Ohmori, K., et al.: "P- and E-selectins recognize sialyl 6-sulfo lewis X, the recently identified L-selectin ligand"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 278. 90-96 (2000)
• [文献書誌] Izawa, M., et al.: "Expression of sialyl 6-sulfo Lewis X is inversely correlated with conventional sialyl Lewis X expression in human colorectal cancer"Cancer Res.. 60. 1410-1416 (2000)