膜結合型増殖因子と受容体型チロシンキナーゼを介したがん細胞の浸潤制御機構

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13216057
• 研究機関: 愛媛大学
• 研究代表者: 東山 繁樹 愛媛大学, 医学部, 教授 (60202272)
• キーワード: HB-EGF / Shedding / ADAM / 胃がん / IL-8 / SH3蛋白質 / EGFファミリー / EGFRトランス活性化

研究概要

本年度はHB-EGFプロセシングを中心に解析し、以下の結果を得た。
1)HB-EGFプロセシングはADAM12ノックアウトマウス由来線維芽細胞では全く認められなかった。この結果よりADAM12がTPA刺激依存性HB-EGFのプロセシング酵素であると結論付けた。
2)胃がん細胞株KATO III細胞でのIL-8依存性EGFRのトランス活性化にはHB-EGFならびにamphiregulinのプロセシングが大きく関与していることが示唆された。さらに、このIL-8依存性のHB-EGFならびにamphiregulinのプロセシングにはADAM12ではなくADAM10が関与していることが強く示唆された。
3)ADAM12の細胞内ドメインに結合蛋白するを酵母two-hybridでスクリーニングし、その結果2つのSH3蛋白質PACSIN3と新規蛋白質Eve-1を同定した。PACSIN3は416アミノ酸からなりC-末端側に3つのSH3ドイメインを持つ。また、Eve-1は767アミノ酸からなりC-末端側に4つのSH3ドイメインを持つEve-1aと23アミノ酸の挿入配列を持ちその結果C-末端側に5つのSH3ドイメインを持つEve-1bの2つのアイソフォームを同定した。
以上の結果から、TPAとIL-8依存性のHB-EGFプロセシングは異なる酵素によって制御されていることが示唆された。また、酵素の活性化制御には複数のSH3蛋白質が関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Iwamoto, R., Higashiyama, S., et al.: "HB-EGF and ErbB signaling is essential for heart function"Pro. Natl, Acad Sci. U.S.A.. (in press). (2003)
• [文献書誌] Frank G.D., Higashiyama, S., et al.: "Distinct mechanism of receptor and nonreceptor tyrosine kinase activation by reactive oxygen species in vascular smooth muscle cells : role of metalloprotease and protein kinase C-*"Mol. Cell. Biol. 23. 1581-1589 (2003)
• [文献書誌] Kurisaki, T., Higashiyama, S., et al.: "Phenotypic Analysis of Meltrin α(ADAM12) -Deficient Mice : Involvement of Meltrin α in Adipogenesis and Myogenesis"Mol. Cell. Biol. 23. 55-61 (2003)
• [文献書誌] Tei, K., Higashiyama, S., et al.: "Roles of cell adhesion molecules in tumor angiogenesis induced by cotransplantation of cancer and endothelial cells to nude rats"Cancer Res.. 62. 6289-6296 (2002)
• [文献書誌] Deepa S.S., Higashiyama, S., et al.: "Specific molecular interactions of oversulfated chondroitin sulfate E with various heparin-binding growth factors : Implications as a physiological binding partner in the brain and other tissues"J. Biol. Chem.. 277. 43707-43716 (2002)