細胞移植療法におけるHLAテトラマーを用いた抗原特異的T細胞の解析とその応用

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13218105
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 滝口 雅文 熊本大学, エイズ学研究センター, 教授 (00183450)
• 研究分担者: 冨山 宏子 熊本大学, エイズ学研究センター, 助手 (50301370)
• キーワード: CD8T細胞 / 細胞傷害性T細胞 / サイトメガロウイルス / EBウイルス / 骨髄移植 / 細胞移入療法 / テトラマー

研究概要

HLA-A*0201,-A*0206,-A*1101抗原とこれらが提示するヒトサイトメガロウイルス(HCMV)及びEBウイルス(EBV)の細胞傷害性T細胞(CTL)エピトープペプチドを用いてテトラマーを作製し、これを用いてHCMV及びEBV特異的CD8T細胞を、フローサイトメトリーを用いて検出した。さらにこれらの特異的CD8T細胞上のCD28,CD45RAの発現を調べてその分化度を解析したところ、健康正常人では、EBV特異的CD8T細胞はCD28^+CD45RA^-のmemory T細胞が、HCMV特異的T細胞はCD28^-CD45RA^-のmemory/effector T細胞及びCD28^-CD45RA^+のeffector T細胞がほとんどを占めている事が明らかになった。これらのウイルス特異的CD8T細胞のほとんどは、ケモカインレセプターCCR5を発現しており、またCCR5のリガンドとなるケモカインによってCCR5^+CD8T細胞が遊走される事から、これらのケモカインがTh1の免疫反応に関与していると考えられた。さらにテトラマー陽性細胞をsortingし、エピトープペプチド刺激して培養することにより、その数を増大する事が可能となった。HCMV特異的CD8T細胞を使った骨髄移植後の細胞移入療法、さらにB細胞リンホーマや上咽頭ガンなど治療のためのEBV特異的CD8T細胞移入療法が、この方法を用いる事により可能である事が示唆された。今後培養条件をさらに検討する事により、臨床応用可能な抗原特異的CD8T細胞の培養法の確立を目指す。

研究成果

• [文献書誌] Fukada, K.: "Functional Expression of the Chemokine Receptor CCR5 on Virus Epitope-Specific Memory and Effector CD8^+ T Cells"J. Immunol.. 168・5. 2225-2232 (2002)
• [文献書誌] Sobao, Y.: "The Role of Hepatitis B Virus-Specific Memory CD8T cells in the Control of Viral Replication"J. Hepatology. 36. 105-111 (2002)
• [文献書誌] Sobao, Y.: "Identification of Hepatitis B Virus-Specific CTL Epitopes Presented by HLA-A^*2402, the Most Common HLA Class I Allele in East Asia"J. Hepatology. 34. 922-929 (2001)
• [文献書誌] Sobao, Y.: "Visual demonstration of HCV-specific memory CD8^+ T cell expansion in patients with acute hepatitis C"Hepatology.. 33. 287-294 (2001)