| 研究概要 |
1.目的
抗癌剤耐性因子の一つであるGST-πの活性を特異的に阻害するGST-π特異的阻害剤を合成し、各種抗癌剤に対する耐性を克服しうるかどうかを検討した。
2.方法と結果
(1)GST-π特異的阻害剤の合成
GST-πの活性を特異的に阻害剤するγ-Glutamyl-S-(benzyl)cysteinyl phenylglycine diethylesterの長鎖アルキルエステルを合成し、HPLCで精製した。
(2)Esteraseに対する安定性の検討
GST-π特異的阻害剤をin vitroでヒトまたはラットのesteraseとincubateして半減期を測定したところ、それぞれ約60分と45分であった。
(3)in vitroにおける薬剤感受性試験
GST-π発現の高い胆管細胞癌細胞株(HuCCT1)に阻害剤を加えて4-HC(cyclophosphamide,CPMの活性体)に対する感受性を検討したところ、IC50は2.7±0.5μMであり、対照群(8.1±0.7μM)に比べて有意な感受性の亢進を認めた。同様にAdriamycin,CDDP,VP-16に対する感受性は亢進したが、5-FU,MMCなどに対する感受性は変化しなかった。
(4)in vivoにおける薬剤感受性試験
ヌードマウスの皮下にHuCCT1を接種し、阻害剤とともにCPMを投与したところ、4週間後の腫瘍重量(48±19mg)は対照群(246±52mg)に比べて有意に低下した。同様に、adriamycinに対する感受性の亢進も認められた。
(5)腫瘍細胞内GST-π活性の測定
腫瘍細胞内のGST-π活性を測定したところ、阻害剤投与群では7.3±1.2であり、対照群(14.5±1.8)に比べて有意に低値であった。
3.結論
GST-π特異的阻害剤は、種々の抗癌剤に対する感受性を高めることが示され、耐性克服剤としての有用性が示唆された。
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