腫瘍選択的増幅型ハイブリッドウイルスベクターの開発とその制御機構の解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13218116
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 岡田 尚巳 自治医科大学, 医学部, 助手 (00326828)
• キーワード: がん / 遺伝子治療 / ハイブリッドベクター / アデノウイルス / レトロウイルス / アデノ随伴ウイルス

研究概要

より強力で安全な自殺遺伝子治療への応用を期待して、ハイブリッドベクターを応用した腫瘍内複製型治療ベクターの検討を行った。(1)腫瘍内でレトロウイルスベクターを産生させ拡散させるシステムとして、自殺遺伝子を搭載したアデノ-レトロハイブリッドウイルスベクターを構築し、担癌動物モデルでの治療効果を確認した。治療遺伝子の効果を上げる工夫として、互いに異なる機序でアポトーシスを誘導するBH3因子(Bim)遺伝子およびHSV-tk遺伝子を腫瘍細胞に導入し、その相乗効果を検討した。さらに、未分化細胞優位に遺伝子導入を行うことを期待し、アデノウイルスと細胞との接着機構を応用した感染標的アダプター分子を開発した。(2)安全性が高いAAVベクターを複製させて癌治療に応用するシステムを検討した。まず、各血清型AAVの感染様式の特徴を比較した。次に放射線や抗癌剤を用いてAAVの一本鎖DNAゲノムから発現型の二本鎖への変換を促進し、遺伝子発現の増強効果を検討した。さらに、治療ベクターと共に、AAVの溶解感染に必要なアデノウイルス初期遺伝子やAAV蛋白質などをアデノウイルスベクターを用いて腫瘍に発現させ、AAVベクターの複製を確認した。以上の基盤技術を各腫瘍の治療モデルに応用することにより、より有効な治療システムの開発が期待される。

研究成果

• [文献書誌] Okada, T. et al.: "Adeno-associated viral vector-mediated gene therapy of ischemia-induced neuronal death"Methods Ehzymol.. 346. 378-393 (2002)
• [文献書誌] Okada, T. et al.: "Adeno-associated virus vectors for gene transfer to the brain"Methods. 28・2. 237-247 (2002)
• [文献書誌] Wang, L.J.et al.: "Neuroprotective effects of glial cell line-derived neurotrophic factor mediated by an adeno-associated virus vector in a transgenic animal model of amyotrophic lateral sclerosis"J.Neurosci.. 22・16. 6920-6928 (2002)
• [文献書誌] Kanazawa, T. et al.: "Suicide gene therapy using AAV-HSVtk/ganciclovir in combination with irradiation results in regression of human head and neck cancer xenografts in nude mice"Gene Ther.. 10・1. 51-58 (2003)
• [文献書誌] Yamaguchi, T. et al.: "Enhancement of thymidine kinase-mediated killing of malignant glioma by BimS, a BH3-only cell death activator"Gene Ther.. (in press). (2003)
• [文献書誌] Nomoto, T. et al.: "Distinct patterns of gene transfer to gerbil hippocampus with recombinant adeno-associated virus type 2 and 5"Neurosci.Lett.. (in press). (2003)