マラリア原虫スポロゾイトの肝細胞感染機構の解明

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13226039
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 鎮西 康雄 三重大学, 医学部, 教授 (60024709)
• 研究分担者: 油田 正夫 三重大学, 医学部, 助手 (90293779)
• キーワード: マラリア / スポロゾイド / 感染機構 / 接着分子 / ESTデータベース

研究概要

マラリア原虫のスポロゾイトは蚊から人への感染に関わる重要なステージである。スポロゾイトの肝臓への感染機構は、医学的にも生物学的にも興味深い対象である。しかし、これまで材料としての扱いにくさのために十分には研究されて来なかった。この研究ではスポロゾイトの肝細胞特異的感染にかかわる分子を同定し機能を解析して、原虫の肝細胞感染の分子機構を解明することを目的とした。逆遺伝学的方法で、スポロゾイトcDNAの網羅的解析、ESTデータベース構築、遺伝子ノックアウトによる機能解析を進めてきた。
モデル実験動物としてネズミマラリア原虫P.bergheiとハマダラカAn.stephensiを用い、次の実験を行った。(1)ハマダラカ唾液腺スポロゾイトからcDNAライブラリーを作製し、cDNAの網羅的解析を行って、ESTデータベースを構築した。(2)細胞接着に関連する分子構造motifを持つ遺伝子をいくつか選定し、全塩基配列を解析した。(3)その中から更に数個の遺伝子を選定しノックアウトした原虫を作製し、機能解析を行って、スポロゾイトの肝細胞への接着感染を介在する鍵分子を同定した。(4)鍵分子の抗体を作製して、免疫電顕により細胞局在や原虫の接着侵入への関わり方を観察した。

研究成果

• [文献書誌] Tetsuro Shinoda, et al.: "Cloning and functional expression of achitinase cDNA from the commun cutworm, Spodoptera litura, using a recombinant"Insect Biochem. Mol. Biol.. 31. 521-532 (2001)
• [文献書誌] Katsuhiko Ando, et al.: "Five cakes of Diphyllobothrium nihonkaiense infection with discovery of plerocercoides from an infective source"J.Parasitol.. 87. 96-100 (2001)
• [文献書誌] Y.Furuta, et al.: "Peroral infectivity of non-occluded viruses of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus and polyhedrin-negative recombinant"J.Gen.Virol.. 82. 307-312 (2001)
• [文献書誌] Masao Yuda, et al.: "von Willebrand Factor A domain-related protein : a novel microneme protein of the malaria ookinete highly conserved"Mol. Biochem. Partasitol.. 116. 65-72 (2001)
• [文献書誌] Toru Kariu, et al.: "Essential function of MAEBL in malarial sporozoite infectioin of the mosquito salivary gland"J. Exp. Med.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Hubert Woitasek et al.: "Analysis of the involvement of the 3'-untranslated regions in regulating mRNA stability for vitellogenin, cyanoprotein a and"Insect Biochem. Mol. Biol.. (in press). (2002)