レコンビナントSERAによるマラリアワクチン開発の基礎研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13226058
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 堀井 俊宏 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (80142305)
• 研究分担者: 松本 芳嗣 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00173922) ; 田井 久美子 大阪大学, 微生物病研究所, 教務職員 (00187907) ; 李 接 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (50333505)
• キーワード: マラリアワクチン / SE36蛋白質 / リスザル / ソロモン諸島 / 疫学調査 / P.falciparum / 前臨床試験

研究概要

我々は熱帯熱マラリア原虫の主要な抗原蛋白質であるSERA(Serine repeat antigen,SERA5)をもとにマラリアワクチンの開発を進めている。本年度の主要な成果は以下の通りである。
1.SE36マラリアワクチン臨床治験薬を用いてリスザルにおけるワクチン試験を行った。ワクチン群(3頭)のリスザルは50μgのSE36を含む治験薬を2回接種し、その後、熱帯熱マラリア原虫のチャレンジ感染を行った。その結果、対照群に比べて、接種3日目にしてすでに有意な原虫率の抑制が観察された。この結果はワクチンによって誘導された抗体によって原虫率が抑制されたことを強く示唆する。また、血中の抗体価は原虫感染によって増強された。このことは、流行地域においてもワクチン効果の持続を保証するものと考えられる。
2.SE36に対する特異抗体が、マラリア発症防御免疫において、どの程度寄与するかを評価するため、ソロモン諸島において血清疫学調査をおこなった。その結果、抗SE36抗体価と血中原虫率及びマラリア発症に強い負の相関が認められた。さらに、高い抗SE36抗体価を示す住民血清をプールし、熱帯熱マラリア原虫の培養液に入れたところ、原虫増殖を抑制した。また血清を前もって組換えSE36蛋白質によって中和することにより、その抑制効果の50%以上が消失した。また、SERA5遺伝子には3つの対立遺伝子型が知られているが、これら対立遺伝子を持つ3種のマラリア原虫株に対しも増殖阻害が観察された。以上の結果はSERA蛋白質のN-末端ドメインが流行地域住民のマラリア発症防御免疫の主たる標的抗原であることを強く示唆する。
3.SE36組換え蛋白質は(財)阪大微生物病研究会との共同研究として、臨調治験薬の生産が進められている。臨床治験薬の前臨床試験(GLP)を(株)富士バイオメディックスに委託し、・ラット/イヌ単回投与毒性試験、・ラット反復投与毒性試験、・ウサギ局所刺激性試験、・遺伝毒性試験、・安全性薬理試験、・分析試験/安走性確認、の各項目について実施した。その結果、特に問題となる所見は認められなかった。

研究成果

• [文献書誌] Safitri I., Jalloh A., Tantular I.S., Pusarawati S., Win T.T., Liu Q., Ferreira M.U., Dachlan Y.P., Horii T., Kawamoto F.: "Sequence diversity in the amino -terminal region of the malaria -vaccine candidate serine repeat antigen (SERA) in natural Plasmodium falc iparum populations."Parasitol.Int. 52. 117-131 (2003)
• [文献書誌] Palacpac N.M.Q., Hiramine Y., Mi-ichi F., Torii M., Kita K., Hiramatsu R., Horii T., Mitamura T.: "Developmental stage -specific triacylglycer ol biosynthesis, degradation and trafficking as lipid bodies in Plasmodium falciparum -infected erythrocyte."J.Cell.Sci.. (In press). (2004)
• [文献書誌] Krungkrai, S., Aoki, S., Palacpac, N.M.Q., Sato, D., Mitamura, T., Krungkrai, J., Horii, T.: "Human Malaria Parasite Orotate Phosphoribosyltransferase : Functional Expression, Characterization of Reaction Kinetic Mechanism and Inhibition Profile."Mol.Biochem.Parasitol.. (In press). (2004)
• [文献書誌] Belperron A.A., Fox B.A., O 'Neil R.H., Peaslee K.A.W., Horii T., Anderson A.C., Bzik D.J.: "Toxoplasma gondii ; Generation of novel tru ncation mutations in the linker domain of dihy drofolate reductase -thymidylate synthase."Expt.Parasitol. (In press).