歯周病原細菌ポルフィロモナス・ジンジバリスの血小板凝集因子の同定とその作用機構

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13226096
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 中山 浩次 長崎大学, 歯学部, 教授 (80150473)
• 研究分担者: 内藤 真理子 長崎大学, 歯学部, 助手 (20244072)
• キーワード: 口腔嫌気性細菌 / ポルフィロモナス・ジンジバリス / 血小板凝集

研究概要

すでに構築している本菌のプロテアーゼや線毛の遺伝子の変異株(1)を用いて血小板凝集能の有無について詳細に検討した。その結果、以下のことがわかった。
(a)本菌の主要な線毛であるHimA線毛の完全欠損株でも野生株同様の血板凝集能を示したことからHimA線毛は本活性とは無関係である。(b)アルギニン特異的プロテアーゼ(RGP)の完全欠損株(rgpA rgpB)、RGPとリジン特異的プロテアーゼ(KGP)の完全欠損株(rgpA rgpB kgp)および血球凝集素完全欠損株(rgpA kgp hagA)はまったく血小板凝集活性を示さなかった。一方、KGPの完全欠損株(kgp)は野生株同様の活性を示した。(c)RGPの阻害剤であるleupeptinは野生株の血小板凝集活性を部分的に抑制したがTLCKは阻害しないことがわかった。また、トロンビンの特異的阻害剤であるhirudinでも抑制されないことがわかった。これらの結果はRGPプロテアーゼ活性の本菌の血小板凝集活性への関与を示唆したが血小板凝集活性のすべてがRGPプロテアーゼ活性で説明がつくかどうかについては疑問の余地が残った。上述の遺伝子群はプロテアーゼドメイン以外に付着因子ドメイン(アドヘジン)をコードしていることから、アドヘジンドメインタンパクの血小板凝集活性への関与もRGPとともに重要な働きをしている可能性が示唆された。(d)予めプロスタグランジンE1で処理した血小板では本菌による凝集は生じないことから血小板内でのシグナル伝達による血小板の活性化が必要な現象であることが示された。

研究成果

• [文献書誌] 中山 浩次: "口腔偏性嫌気性細菌porphyromonas gingiralisの病原性に関する分子遺伝学的研究(日本細菌学会平成12年度小林六造記念賞受賞論文)"日本細菌学雑誌. 56・4. 573-585 (2001)
• [文献書誌] Grenier, D. et al.: "Role of Gingipains in growth of Porphyromonas gingivalis in the presence of human serum albumin"Infection and Immunity. 69・8. 5166-5172 (2001)
• [文献書誌] Kamaguchi, A. et al.: "Coaggregation of Porphyromonas gingivalis and Prevotella intermedia"Microbiology and Immunology. 44・9. 649-656 (2001)
• [文献書誌] Chen, T. et al.: "Porphyromonas gingivalis gingipains and adhesion to epithelial cells"Infection and Immunity. 69・5. 3048-3056 (2001)
• [文献書誌] Grenier, D. et al.: "Studies on the aminopeptidace activities of Porphyromonas gingivalis"Oral Microbiology and Immunology. 16・4. 212-217 (2001)
• [文献書誌] Yoneda, M. et al.: "Mixed infection of Porphyromonas gingivalis and Bacteroides for sythus in a marine abscess model : involvement of gingipains in a synergistic effect"J. Periodental Research. 36. 237-243 (2001)