研究概要 |
I.ストレス-脳-下垂体-間腎系の分子機構の解明 メダカCRHmRNA及びアルギニンバソトシン(AVT) mRNAのリアルタイム定量PCR系を確立し、それぞれの遺伝子発現量の日周変化を調べた.その結果,いずれの遺伝子発現量も暗期に高く,明期になると減少することが判明した.次にメダカを用いて,(A)30Lの水槽区,(B)1L水槽区,、(C)1L水槽+水流負荷区に分けて,CRH遺伝子及びAVT遺伝子発現量,体部コルチゾル量を測定したところ,いずれの値も(C)区は(A)区に比して有意に増加した.さらにメダカを用いて,(A)30Lの水槽区,(B)1L水槽区,(C)1L水槽+空気暴露区に分けて,AVT遺伝子発現量,コルチゾル量を測定したところ,いずれの値も(C)区は(A)区に比して有意に増加した.また,CRHファミリーに属するウロテンシンIの遺伝子構造とウロコルチンのcDNAの構造を明らかにした.またメダカのCRH受容体1の全長塩基配列も明らかにした. II.ストレスによる生殖系の抑制機構の解明 メダカを1週間にわたり毎日0,2,4,8,16分の空気暴露を繰り返したところ16分区で頭部を除いた体中のコルチゾル量が増加する事がわかった。そこで毎日16分空気暴露を26日間繰り返したところ、GSIは8日目以降減少し,コルチゾル量も15日目にピークとなった.この結果,空気暴露ストレスにより生殖抑制がおこることがわかった. III.ストレスによる免疫系の抑制機構 コルチゾルはコイの培養白血球のIgM産生を抑制した.この抑制は培養白血球のアポトーシスが一因であることが明らかになった. フグでは,コルチゾルは培養抹消血,脾臓,頭腎リンパ球のアポトーシスを誘導したが,テストステロン,11-ケトテストステロン,エストラジオールは影響を与えなかった.さらにコルチゾルは脾臓,頭腎リンパ球のIgMmRNA量を低下させることが判明した.
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