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キメラRNA/DNAの相同組み換え反応を利用してジストロフィン遺伝子の異常を修復しようとするものである。現在のところ遺伝子修復効率は低く、高感度に遺伝子修復を検出できる系の確立に着手した。ここでは、GFPという緑色の蛍光を発するタンパクの発現量から遺伝子が修正されたことを肉眼的に検証できる系を確立しようとした。まず、正常配列からなるジストロフィンcDNAの一部の配列をGFP発現ベクターの上流に組み込んだ人工遺伝子を作製する。そして、これを細胞に導入してジストロフィンとGFPとが融合したタンパクを発現させ、発する蛍光を蛍光顕微鏡で観察した。その結果、このGFP発現システムが有効に機能することが判明した。
そこで、GFP配列の上流に私たちが発見している患者の異常なジストロフィンcDNA塩基配列を組み込んだ発現ベクターを作製した。このベクターを細胞に導入し、GFPとの融合タンパクを発現させた。この条件では、ジストロフィンcDNAに変異があり、アミノ酸読み取り枠にずれがあるためGFPとの融合タンパクは産生されず、蛍光は観察されなかった。
そこで、この遺伝子の異常を修復するため患者で発見された遺伝子異常部位に相当する正常のジストロフィン遺伝子配列などからなるキメラRNA/DNAを合成した。この合成したキメラRNA/DNAとGFP発現人工遺伝子とをキャリアー物質とともに混じて培養細胞にコトランスフェクションした。そして、正常の配列と置き換った人工遺伝子からはジストロフィンとGFPの融合タンパクが産生される事を確認した。しかし、GFP陽性細胞数はまだ少なく、遺伝子修復効率が未だ低いことが示唆され、現在さらに多様な配列を用いて高効率に遺伝子修復が生じる化合物を検索中である。
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