| 研究分担者 |
佐藤 かおり 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (90287772)
柳下 寿郎 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (50256989)
田谷 雄二 日本歯科大学, 歯学部, 講師 (30197587)
橋本 修一 日本歯科大学, 歯学部, 助教授 (50050688)
島津 徳人 日本歯科大学, 歯学部, 助手 (10297947)
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| 研究概要 |
頭蓋顔面部の形態形成には多数の遺伝子(その転写産物)が関与しており、それらの発現は時間的・空間的に精妙に制御されている。本年度においては、野生型マウスとこれまで系統交配してきたエンドセリン1ノックアウトマウスについて、胎生9日目より生誕後4日目までの胎仔・新生仔の骨格標本(アルシャンブルー・アリザリンレッド二重染色)を作製し、全身骨格と頭部骨格の画像データベースを構築、ネット上に公開する準備を進めている。初年度に購入したmicrodissection装置を用いて、E10-14の舌器官、E13.5-E16の一次と二次口蓋の上皮と間葉、E14-17のメッケル軟骨原基および同時期の顎関節原基について、細胞集団の顕微分離を継続している。本年度に別課題の科研費援助で購入したリアルタイムPCRでの遺伝子発現ネットワークの検索に向けて、総数60種のプローベの設計とリアルタイムPCR条件決めを実施した。二次口蓋上皮でのRhoファミリー関連遺伝子の発現として、構成的発現を示す遺伝子群(n-wasp, lim-kinese2, p160 rock, ezrin, profilin 1)と、発生時期特異的な発現を示す遺伝子群(cdc42,snail, lutheran)を区別し、上皮間葉転換に関連してsnailの発現上昇とlutheranの発現減衰を確かめている。また、舌の発生時期でのmyoD、myf5、shh、HGF、chordin、nogginの変動を調べた。メッケル軟骨の発生と下顎骨、顎関節の形態形成に関連して、連続薄切標本(アルカリフォスファターゼ酵素組織化学とビクトリアブルー・HE重染色、von Kossa染色の併用)から立体構築像を作成、メッケル軟骨の石灰化部位と吸収開始部位、顎関節原基と下顎頭膜内骨化との空間的関連について解析を進めている。
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