| 研究課題/領域番号 |
13308047
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| 研究機関 | 理化学研究所 |
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研究代表者 |
古市 貞一 理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, チームリーダー(研究職) (50219094)
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| 研究分担者 |
高野 りや 理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (80332328)
中村 浩 理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (70321792)
白石 陽子 理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 基礎科学特別研究員 (50311345)
吉川 文生 理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (70342871)
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| キーワード | 小脳 / Cupidin / Gene Chip / シナプス / NMDA受容体 / 組換えウイルスベクター / 遺伝子発現 / グルタミン酸 |
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| 研究概要 |
マウスの小脳構築の分子メカニズムを遺伝子レベルで解明することを目的とした。
Cupidinは発達中の後シナプス肥厚部に存在するグルタミン酸神経伝達系とアクチン細胞骨格系のアダプター蛋白質である。小脳初代培養顆粒細胞をグルタミン酸刺激するとNMDA受容体を介したCa^<2+>流入の活性化でシナプスにおけるCupidinクラスターが消失することがわかった。Cupidinは刺激依存的な後シナプス変化にも関わることが示唆された。
LacZ遺伝子が小脳の側矢状断方向のプルキンエ細胞亜集団に帯状発現するTgマウスを用いて、遺伝子発現とコンパートメント形成について解析した。このLacZの分子コンパートメントはこれまで知られているZebrinIIとは異なり、reeler変異によって影響されないことがわかった。
Affymetrix-GeneChipを用いて小脳構築における遺伝子発現についてDNA microarray解析を行った。12,654遺伝子のうち81.6%がいずれかの小脳発達ステージで発現しており、そのうち2倍以上の発現変化を示すものは897遺伝子あった。発現パターンや機能によってクラスタリングすることで、小脳形成の遺伝子発現プロファイルを明らかにした。
AdVとSFVの組換えウイルスベクターを用いて培養小脳ニューロンに特異的な遺伝子発現系を開発した。
現在、新規遺伝子候補(約1,000遺伝子)の中から、小脳形成に関わる遺伝子を中心にその構造と機能の解析を進めている。
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