2003 年度実績報告書

マウス小脳の分子構築についての研究

研究課題

研究課題/領域番号	13308047
研究機関	独立行政法人理化学研究所
研究代表者	古市貞一独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, チームリーダー (50219094)
研究分担者	松木亨独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (90332329) 佐藤朗独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (60321767) 吉川文生独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (70342871) 庄司敏独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (10333353) 友村美根子独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, 研究員 (30217559)
キーワード	小脳 / 生後発達 / 遺伝子発現 / トランスクリプトーム / Cupidin / Homer / CPAS2 / データベース / マイクロアレイ
研究概要	マウス小脳めの生後発達の遺伝的基盤を解明するために、ディファレンシャル・ディスプレイ、マイクロアレイ、GeneChipを用いた解析によって発達ステー一ジに特異的な遺伝子発現のゲノムワイドな探索を行った。特異的な遺伝子群の時空間的発現プロファイルをRT-PCRやin situハイブリダイゼーションで解析して、小脳形成トランスクリプトーム・データベースへの体系化を行った。この解析で多くの新規脳形成遺伝子候補をクローニングした。シナプス後肥厚部アダプタータンパク質Cupidin/Homer2はグルタミン酸受容体の後シナプス複合体の形成及びその生理機能において活動依存的な可動性アダプターとして機能することを明らかにした。Homer familyメンバーが発達中の脳で領域や組胞特異的に分布することを明らかにした。分泌顆粒のCa2+依存性開口放出に関係するCAPSのparalogであるCAPS2をクローニングした。CAPS2はプルキンエ細胞とシナプス結合する平行線維終末の小胞様構造などに局在し、CAPS2が会合する小胞細胞画分にはBDNFとNT-3のニューロトロフィンが含有していることを示した。小脳初代培養顆粒細胞において、CAPS2を過剰発現すると高濃度KCI刺激に依存的な(脱分極刺激依存的な)NT-3の分泌を促進するとともに、共存するプルキンエ細胞の生存率を高めることから、CAPS2は小脳ニューロンの分化と生存に不可欠なニューロトロフィンの活動依存的な分泌の調節することが示唆された。 3つのリン酸化関連遺伝子(アポトーシス活性関連チロシンキナーゼAATYK、新規Ser/ThrキナーゼEbr、チロシンキナーゼアダプターCas)と2つの新規白質形成関連遺伝子(ミエリン・パラノードループ特異的遺伝子、PLDモチーフ遺伝子)の構造機能と脳発達における発現分布を解析した。

研究成果

(11件)

すべてその他

すべて文献書誌 (11件)

[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Coincidence in dendritic clustering and synaptic targeting of Homer proteins and NMDA receptor complex proteins NR2B and PSD95 during development of cultured hippocampal neurons."Molecular and Cellular Neuroscience. 22. 188-201 (2003)
[文献書誌] Tomomura, M.: "Differential expression and function of apoptosis-associated tyrosine kinase (AATYK) in the developing mouse brain."Molecular Brain Research. 112. 103-112 (2003)
[文献書誌] Uchida, K.: "Critical regions for activation gating of the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor."Journal of Biological Chemistry. 278. 16551-16560 (2003)
[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Glutamate-induced declustering of postsynaptic adaptor protein Cupidin (Homer 2/vesl-2) in cultured cerebellar granule cells."Journal of Neurochemistry. 87. 364-376 (2003)
[文献書誌] Sadakata, T.: "The secretory granule-associated protein CAPS2 regulates neurotrophin release and cell survival."Journal of Neuroscience. 24. 43-52 (2004)
[文献書誌] Yanagida, E.: "Functional expression of Ca^<2+> signaling pathways in mouse embryonic stem cells."Cell Calcium. (in press). (2004)
[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Differential expression of Homer family proteins in the developing mouse brain."J.Comp.Neurol.. (in press). (2004)
[文献書誌] Sato, Y.: "Cell specificity and efficiency of the Semliki forest virus vector- and adenovirus vector-mediated gene expression in mouse cerebellum,"J.Neuroscience Methods. (in press). (2004)
[文献書誌] 古市貞一: "脳の科学:小脳形成の遺伝子システム"星和書店. 612 (2003)
[文献書誌] 吉川文生: "遺伝子医学:抗体を利用したタンパクの構造・機能・局在解析"メディカルドゥ. 170 (2003)
[文献書誌] 佐藤明: "蛋白質核酸酵素:小脳神経回路形成と遺伝子発現"共立出版. 500 (2004)

2003 年度 実績報告書

マウス小脳の分子構築についての研究

研究代表者

古市 貞一 独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, チームリーダー (50219094)

研究成果

[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Coincidence in dendritic clustering and synaptic targeting of Homer proteins and NMDA receptor complex proteins NR2B and PSD95 during development of cultured hippocampal neurons."Molecular and Cellular Neuroscience. 22. 188-201 (2003)

[文献書誌] Tomomura, M.: "Differential expression and function of apoptosis-associated tyrosine kinase (AATYK) in the developing mouse brain."Molecular Brain Research. 112. 103-112 (2003)

[文献書誌] Uchida, K.: "Critical regions for activation gating of the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor."Journal of Biological Chemistry. 278. 16551-16560 (2003)

[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Glutamate-induced declustering of postsynaptic adaptor protein Cupidin (Homer 2/vesl-2) in cultured cerebellar granule cells."Journal of Neurochemistry. 87. 364-376 (2003)

[文献書誌] Sadakata, T.: "The secretory granule-associated protein CAPS2 regulates neurotrophin release and cell survival."Journal of Neuroscience. 24. 43-52 (2004)

[文献書誌] Yanagida, E.: "Functional expression of Ca^<2+> signaling pathways in mouse embryonic stem cells."Cell Calcium. (in press). (2004)

[文献書誌] Shiraishi, Y.: "Differential expression of Homer family proteins in the developing mouse brain."J.Comp.Neurol.. (in press). (2004)

[文献書誌] Sato, Y.: "Cell specificity and efficiency of the Semliki forest virus vector- and adenovirus vector-mediated gene expression in mouse cerebellum,"J.Neuroscience Methods. (in press). (2004)

[文献書誌] 古市 貞一: "脳の科学:小脳形成の遺伝子システム"星和書店. 612 (2003)

[文献書誌] 吉川 文生: "遺伝子医学:抗体を利用したタンパクの構造・機能・局在解析"メディカルドゥ. 170 (2003)

[文献書誌] 佐藤 明: "蛋白質核酸酵素:小脳神経回路形成と遺伝子発現"共立出版. 500 (2004)

2003 年度実績報告書

古市貞一独立行政法人理化学研究所, 分子神経形成研究チーム, チームリーダー (50219094)

[文献書誌] 古市貞一: "脳の科学:小脳形成の遺伝子システム"星和書店. 612 (2003)

[文献書誌] 吉川文生: "遺伝子医学:抗体を利用したタンパクの構造・機能・局在解析"メディカルドゥ. 170 (2003)

[文献書誌] 佐藤明: "蛋白質核酸酵素:小脳神経回路形成と遺伝子発現"共立出版. 500 (2004)