研究課題
基盤研究(A)
本研究はウマバベシア病に対する感度と特異性の高い国際標準診断法を開発・実用化することを目標として、Babesia equiとB.caballiの組換え原虫タンパク質の作製、免疫原性の解析、組換え原虫タンパク質を用いたELISA、イムノクラマト法の確立、世界各国の血清試料を用いた血清診断法の評価を行い、下記のような成果を得た。1.バベシア原虫の新規の抗原感染ウマから得られた血清を用いたクローニングにより、新規のB.equi Be82、Be158遺伝子およびB.caballi Bc134遺伝子が得られた。大腸菌で発現された原虫タンパク質をELISA用抗原として用いたところ、高い特異性および感度が認められた。2.ウマバベシア原虫組換え抗原産生の検討B.equiのメロゾイト表面抗原(EMA-1)およびB.caballiのロプトリー抗原の組み換抗原(BC48)を大腸菌を用いて産生し、発現された原虫タンパク質は分子量、抗原性など原虫由来のものと一致することが確認された。3.組換え抗原を用いたELISAB.equiのメロゾイト表面抗原(EMA-2)およびB.caballiのロプトリー抗原の組み換え抗原(BC48)を用いたELISAは感度及び特異性に優れていることが示された。また、野外血清を用いた試験でも、同様の結果が得られた。4.イムノクロマト法の検討高濃度に発現されたB.equiのEMA-2およびB.caballiのBC48を用いて、特異的反応が高く、短時間で判定可能なイムノクロマト法の開発に成功した。また、これら2種類の抗原を一つのスティックに固定して、同時に2種類のバベシア感染を診断できるキットも開発された。以上のように本研究では、B.equiのメロゾイト表面抗原(EMA-2)およびB.caballiのBC48が最も診断用抗原として優れていることが判明した。また、両抗原を用いたELISAおよびイムノクロマト法は特異性および感度に優れていることが示された。今後世界的な比較実験及び評価を行うことによって、国際的標準診断法の診断用抗原として使用される可能性が極めて高いと期待される。
すべて 2005 2004 2003 2002 2001 1999
すべて 雑誌論文 (46件) 図書 (1件) 産業財産権 (2件)
Vet.Parasitol. 127
ページ: 35-38
Parasitology 130
ページ: 489-492
Vet.Parasitol. 129
ページ: 43-49
Vet Parasitol. 127
Clin Diagn Lab Immunol. 12
ページ: 334-338
Parasitology (in press)
Vet Parasitol. (in press)
Mol.Biochem.Parasitol. 136
ページ: 165-172
J.Vet.Med.Sci. 66
ページ: 1517-1521
Clin.Diagn.Lab.Immunol. 12
Antimicrob Agents Chemother. 48
ページ: 236-341
Clin Diagn Lab Immunol. 11
ページ: 211-215
J Clin Microbiol. 42
ページ: 359-361
Mol Biochem Parasitol. 133
ページ: 221-227
Infect Immun. 72
ページ: 1795-1798
ページ: 1601-1604
J Parasitol. 90
ページ: 387-391
ページ: 2465-2469
Mol Biochem Parasitol. 136
J Vet Med Sci. 2004 66
Infect Immun.2003 Jan 71
ページ: 411-417
Antimicrob Agents Chemother. 47
ページ: 800-803
J Clin Microbiol. 41
ページ: 547-551
ページ: 1147-1151
Am J Trop Med Hyg. 68
ページ: 334-340
J Parasitol. 89
ページ: 604-606
Clin Diagn Lab Immunol. 10
ページ: 596-601
J Vet Med Sci. 65
ページ: 1015-1017
Mol Biochem Parasitol. 131
ページ: 129-136
Parasitology. 127
ページ: 311-315
J Clin Microbiol. 40
ページ: 1470-1474
J Vet Med Sci. 64
ページ: 325-328
Vet Parasitol. 107
ページ: 351-357
Vet Parasitol. 108
ページ: 179-182
ページ: 727-730
Infect Immun. 70
ページ: 5822-5826
ページ: 3771-3775
J Clin Microbiol. 39
ページ: 705-709
Int J Parasitol. 31
ページ: 384-386
Clin Diagn Lab Immunol. 8
ページ: 645-646
ページ: 2603-2609
J Vet Med Sci. 63
ページ: 977-981
ページ: 1159-1160
ページ: 1673-1679
Vet Parasitol. 102
ページ: 185-191
J Parasitol. 87
ページ: 1484-1486