2003 年度実績報告書

アンドロゲン受容体AF-1特異的コアクチベーター遺伝子のクローニングと創薬の開発

研究課題

研究課題/領域番号	13357010
研究機関	九州大学
研究代表者	名和田新九州大学, 大学病院, 教授 (10038820)
研究分担者	岡部泰二郎九州大学, 大学病院, 助手 (40264030) 後藤公宣九州大学, 大学病院, 助手 (90284512) 柳瀬敏彦九州大学, 大学院・医学研究院, 助教授 (30239818) 野村政壽九州大学, 大学病院, 助手 (30315080)
キーワード	Yeast Two-hybrid assay / AR AF-1 / GSTプルダウン / cDNA cloning
研究概要	最終年度は、平成13年度に我々がアンドロゲン受容体(AR)AF-1領域結合性の新規の転写共役因子として同定したANT-1の機能的ドメインを明らかにし、機能マップを作製した。このタンパク質は、スプライシング機構の中で重要な役割を占める、U5snRNPに対する結合タンパク質として知られるp106と同一のものである。過去の研究で、ANT-1(p106)そのものにはスプライシング活性は無いことが明らかとなっている。 ANT-1は、そのN端側のおよそ半分で、ARを完全に転写誘導することが明らかとなったため、C端側よりdeletionをかけた断片の発現ベクターを作製し、AR発現ベクターとともにco-transfectionしてレポーターアッセイを施行、さらにそれらの断片と、蛍光タンパク質GFPとの融合タンパク質発現プラスミドを作製し、核移行および核内クラスター形成能を共焦点顕微鏡を用いて観察し、ANT-1の核移行には、アミノ酸残基145から172の間にある、塩基性アミノ酸の繰り返しが必須であることが明らかとなった。さらに、ANT(1-200)、ANT(1-172)は核移行し、転写誘導能も有していたが、核内クラスターは形成しなかった。このことより、我々が当初予想したごとく、ANT-1のコアクチベーターとしての機能に、核内クラスター形成は必須でないことが明らかとなった。今後、これらの情報を元として、創薬への応用を図る目的で、AR・ANT-1複合体に含まれるkeymoleculeを同定する予定である。

研究成果

(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] Mukasa C, Nomura M, Tanaka T, Tanaka K, Nishi Y, Okabe T, et al.: "Activin signaling through type1B activin receptor simulates aromatase activity in the ovarian granulose cell-like granulose (KGN) cells"Endocrinology. 144. 1603-1611 (2003)
[文献書誌] Lu ZH, Mu YM, Wang BA, Li XL, Lu JM, Li JY, Pan CY, et al.: "Saturated free fatty acids, palmitic acid and stearic acid, induce apoptosis by stimulation of ceramide generation in rat testicular Leydig cell"biochem.Biophys.Res.Commun,. 303. 1002-1007 (2003)
[文献書誌] Yanase T, Suzuki S, Goto K, Nomura M, Okabe T, et al.: "Aromatase in Bone : Roles of Vitamin D3 and Androgens"J Steroid Biochem Molec. 86. 393-397 (2003)
[文献書誌] Goto K, Zhao Y, Saito M, Tomura A, Morinaga H, et al.: "Activation function-1 domain of androgen receptor contributes the interaction between two distinct sets of subnuclear compartments"J Steroid Biochem Molec. 85. 201-208 (2003)
[文献書誌] Fan W, Yanase T, Wei L, Oba K, Nomura M, Okabe T, et al.: "Functional characterization of a new human Ad4BP/SF-1 Variation, G146A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 311. 987-994 (2003)

2003 年度 実績報告書

アンドロゲン受容体AF-1特異的コアクチベーター遺伝子のクローニングと創薬の開発

研究代表者

名和田 新 九州大学, 大学病院, 教授 (10038820)

研究成果

[文献書誌] Mukasa C, Nomura M, Tanaka T, Tanaka K, Nishi Y, Okabe T, et al.: "Activin signaling through type1B activin receptor simulates aromatase activity in the ovarian granulose cell-like granulose (KGN) cells"Endocrinology. 144. 1603-1611 (2003)

[文献書誌] Lu ZH, Mu YM, Wang BA, Li XL, Lu JM, Li JY, Pan CY, et al.: "Saturated free fatty acids, palmitic acid and stearic acid, induce apoptosis by stimulation of ceramide generation in rat testicular Leydig cell"biochem.Biophys.Res.Commun,. 303. 1002-1007 (2003)

[文献書誌] Yanase T, Suzuki S, Goto K, Nomura M, Okabe T, et al.: "Aromatase in Bone : Roles of Vitamin D3 and Androgens"J Steroid Biochem Molec. 86. 393-397 (2003)

[文献書誌] Goto K, Zhao Y, Saito M, Tomura A, Morinaga H, et al.: "Activation function-1 domain of androgen receptor contributes the interaction between two distinct sets of subnuclear compartments"J Steroid Biochem Molec. 85. 201-208 (2003)

[文献書誌] Fan W, Yanase T, Wei L, Oba K, Nomura M, Okabe T, et al.: "Functional characterization of a new human Ad4BP/SF-1 Variation, G146A"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 311. 987-994 (2003)

2003 年度実績報告書

名和田新九州大学, 大学病院, 教授 (10038820)