バラの根頭がんしゅ病抵抗性機構の解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13460011
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 福井 博一 岐阜大学, 農学部, 教授 (20183585)
• 研究分担者: 景山 幸二 岐阜大学, 流域圏科学研究センター, 教授 (50224366) ; 松本 省吾 岐阜大学, 教育学部, 助教授 (90241489)
• キーワード: 根頭がんしゅ病 / Agrobacterium tumefaciens / 抵抗性台木 / Acetosyringone

研究概要

1)温室で栽培されている根頭がんしゅ病罹病性品種Dukatから10〜15cmに伸長した若いシュートを採取し、その節間をAgrobacterium tumefaciens懸濁液に48時間あるいは72時間浸漬した後、クラフォランで3回洗浄して、その後植物ホルモン無添加培地で培養した結果、菌密度1010個/mlの懸濁液に72時間浸漬して接種し、クラフォラン100ppmで3回洗浄して培養することで、6週間後に70%の個体でゴールが形成された(図1)。ゴールのオピンアッセイを行った結果、全てのゴールでノパリンが確認でき、Agrobacterium tumefaciensの感染によって形成されたゴールであることが確認できた。
2)標準菌株を用いたPCRによってノパリンを生成するグループとオクトピンを生成するグループに分類でき、ノパリンタイプはRFLPによってA208とR225fに分類できた。全国各地のバラから単離した54菌株について分類を行った結果、35菌株はR225fノパリンタイプで、7菌株がオクトピンタイプでであった。この他、GOU1はA208ノパリンタイプであり、11菌株は他のオピンタイプと分類された。
3)R. multifloraの抽出試料をLC/MSで分析した結果、4-hydroxy-3-methoxybenzoic acid (vanillic acid)、4-hydroxyacetophenone、4-hydroxy-3-methoxyacetophenone (acetovanillon)、3,5dimethoxy-4-hydroxyacetophenone (acetosyringone)、3,5-dimethoxy-4-hydroxycynamic acid (sinapic acid)の存在が確認された。同様にGC/MSを用いて分析した結果、4-hydroxyacetophenone、4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde (vanillin)、4-hydroxy-3-methoxycinamic acid (ferulic acid)が同定された。

研究成果

• [文献書誌] Tan, B.S., K.Hasuo, S.Kawai, K.Kageyama, S.Matsumoto, H.Fukui: "Resistance of Rose Cultivars to Crown Gall Disease are Related to the Quantity of Acetosyringone Derivatives Exudates"XXVIth International Horticultural Congress & Exhibition. 464-464 (2002)
• [文献書誌] 横田知樹, 陳敏詩, 福井博一: "コルヒチンおよびオリザリンによるノイバラ(Rosa multiflora)の4倍性固体の作出"園芸学会雑誌. 71別2. 482-482 (2002)
• [文献書誌] Tan, B.S., K.Hasuo, S.Kawai, K.Kageyama, S.Matsumoto, H.Fukui: "Resistance of Roses to Crown Gall Disease are Related to the Quantity of Acetosyringone Derivatives Exudates"Acta Horticulturae. (In press). (2003)
• [文献書誌] Tan, B.S., J.Yabuki, S.Matsunoto, K.Kageyama, H.Fukui: "Identification of Agrobacterium tumefaciens Strains in Japan Using PCR"Journal of General Plant Pathology. (In press). (2003)