研究課題/領域番号 |
13460122
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研究機関 | 東北大学 |
研究代表者 |
山口 高弘 東北大学, 大学院・農学研究科, 教授 (20111297)
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研究分担者 |
渡邊 康一 東北大学, 大学院・農学研究科, 助手 (80261494)
麻生 久 東北大学, 大学院・農学研究科, 助教授 (50241625)
西森 克彦 東北大学, 大学院・農学研究科, 教授 (10164609)
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キーワード | ウシ下垂体前葉 / ガラニン / オレキシン / レプチン / ニューロペプタイドY / GH分泌 / GH軸 / 摂食調節 |
研究概要 |
本研究では、ウシ下垂体前葉細胞の摂食神経ペプチド(ガラニン、オレキシン、レプチン、ニューロペプチドY)の発現とこれらペプチドのGHの合成と分泌に対する作用を明らかにし、GH軸と摂食調節との関係を解析する。本年度は牛下垂体前葉細胞でのオレキシンとオレキシンレセプターの発現を解析するとともに、昨年確立したGH細胞の培養システムを用いて、オレキシンのホルモン分泌に対する作用を検討した。得られた成績は以下の通りである。 1)二重免疫組織化学的染色により、ウシ下垂体前葉のプロラクチン産生細胞(Mommotrophs)にオレキシンが存在することが証明された。また、視床下部の神経核細胞でオレキシンの発現が免疫組織学ならびにin situ gybridization法で証明された。 2)RT-PCR法で下垂体前葉と視床下部でともに、オレキシンmRNAの発現が確認された。PCR産物のクローニングを行い、オレキシンAとBの部分塩基配列を決定した。ウシのオレキシンAのアミノ酸配列は多種と同様であり、オレキシンBはヒト、ラットとそれぞれアミノ酸1残基の違いがあった。 3)オレキシンレセプター1(OXR1)のmRNAの発現が前葉細胞と視床下部で認められた。前葉ではMommotrophsと一部の成長ホルモン産生細胞(Somatotrophs)が抗OXR1抗体で染色された。このことから、オレキシンがオートクライン的に作用する可能性が強く示唆された。 4)ウシ下垂体前葉細胞の培養系で、オレキシンAのGHとPRLの分泌作用を解析した。オレキシンAの単独添加でGHとPRLの分泌には影響が認めたれなかった。また、GHRHおよびTSHRHの存在下のこれらホルモン分泌亢進でも、オレキシンA添加の影響は認めたれなかった。このことからウシ下垂体前葉において、オレキシンAは他の因子と協調して前葉ホルモンを調節、または前葉細胞の分化、成熟に関与する可能性が示された。
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