2001 年度実績報告書

肝臓星細胞の幹細胞の単離とクローナルな増殖の研究

研究課題

研究課題/領域番号	13470001
研究機関	秋田大学
研究代表者	妹尾春樹秋田大学, 医学部, 教授 (90171355)
研究分担者	佐藤岳也秋田大学, 医学部, 助手 (10312696) 今井克幸秋田大学, 医学部, 助手 (80006741) 佐藤充秋田大学, 医学部, 助教授 (60226008)
キーワード	肝臓星細胞 / 幹細胞 / 横中隔 / 分化 / ビタミンA貯蔵細胞 / クローン / 間葉系細胞 / 前腸
研究概要	肝臓星細胞(ビタミンA貯蔵細胞、伊東細胞、脂肪摂取細胞)の実際の直接の幹細胞を純粋に得て、「クローン」として増殖させ、細胞の性状を分析し、その増殖と分化の分子メカニズムを明らかにしつつある。胎生期の正常マウスの胎仔の前腸から肝臓星細胞の幹細胞を単離する目的で、胎生初期の胎仔を実体顕微鏡、光学顕微鏡を用いて詳細に観察し、前腸と、肝臓の間葉組織となる横中隔(Septum transversum)が混じる時点を突き止めた。胎生9.5日から10.5日であった。横中暉に存在する間葉系細胞の星細胞への分化はこの細胞の特異的マーカーである、デスミン、α-smooth muscle actin、細胞内レチノール結合タンパク質タイプ1を用いて、免疫蛍光法でおこなった。前腸と横中隔が別々に存在している状態で、実体顕微鏡、光学顕微鏡、マイクロマニピュレーターおよび眼科用鋏を用いて横中隔から間葉系細胞(この中に星細胞の幹細胞が含まれる)を採取した。得られた細胞の集塊を酵素で処理して、ばらばらに単離し、細胞懸濁液にしたうえで培養皿中に播種した。この際に限界希釈法を用いて一枚の培養皿中に細胞が一つ播種されるようにした。以上の手法で得た細胞を性状分析している。細胞は多数の突起を伸ばしていて、肝臓実質細胞とは明らかに異なる形態をしていた。いっぽう、デスミン、α-smooth muscle actin、細胞内レチノール結合タンパク質タイプ1の発現を、免疫蛍光法で解析し、発現陽性細胞がみられ、いくつかの可能性のある細胞が得られつつある。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kojima, N.: "Enhanced expression of B7-1,B7-2,and ICAM-1 in sinusoidal endothelial cells by ischemia/reperfusion injury in rat liver"Hematology. 34. 751-757 (2001)
[文献書誌] Senoo, H.: "Transport and storage of vitamin A in arctic animals"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 207-209 (2001)
[文献書誌] Sato, M.: "Nuclear deviation in heptic parenchymal cells on sinusoidal surface in arctic animals"Cell Struct. Func.. 26. 71-77 (2001)
[文献書誌] Imai, K.: "Degradation of extracellular matrix by the stellate cells-An analysis in the intestine of the lamprey and cultured human stellate cells-"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 225-226 (2001)
[文献書誌] Sato, M.: "Induction of cellular process elongation mediated by microtubule-associated protein 2 in hepatic stellate cells cultured on type I collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 205-206 (2001)
[文献書誌] Kojima, N.: "Upregulation of sell adhesion molecules,B7-1,B7-2,and ICAM-1,in hepatic sinusoidal endothelial cells after ischemia/reperfusion"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 43-46 (2001)
[文献書誌] 妹尾春樹: "バイオサイエンスの新世紀、第8巻多細胞体の構築と細胞接着システム"共立出版. 208 (2001)

2001 年度 実績報告書

肝臓星細胞の幹細胞の単離とクローナルな増殖の研究

研究代表者

妹尾 春樹 秋田大学, 医学部, 教授 (90171355)

研究成果

[文献書誌] Kojima, N.: "Enhanced expression of B7-1,B7-2,and ICAM-1 in sinusoidal endothelial cells by ischemia/reperfusion injury in rat liver"Hematology. 34. 751-757 (2001)

[文献書誌] Senoo, H.: "Transport and storage of vitamin A in arctic animals"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 207-209 (2001)

[文献書誌] Sato, M.: "Nuclear deviation in heptic parenchymal cells on sinusoidal surface in arctic animals"Cell Struct. Func.. 26. 71-77 (2001)

[文献書誌] Imai, K.: "Degradation of extracellular matrix by the stellate cells-An analysis in the intestine of the lamprey and cultured human stellate cells-"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 225-226 (2001)

[文献書誌] Sato, M.: "Induction of cellular process elongation mediated by microtubule-associated protein 2 in hepatic stellate cells cultured on type I collagen gel"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 205-206 (2001)

[文献書誌] Kojima, N.: "Upregulation of sell adhesion molecules,B7-1,B7-2,and ICAM-1,in hepatic sinusoidal endothelial cells after ischemia/reperfusion"Cells Hepatic Sinusoid. 8. 43-46 (2001)

[文献書誌] 妹尾 春樹: "バイオサイエンスの新世紀、第8巻 多細胞体の構築と細胞接着システム"共立出版. 208 (2001)

2001 年度実績報告書

妹尾春樹秋田大学, 医学部, 教授 (90171355)

[文献書誌] 妹尾春樹: "バイオサイエンスの新世紀、第8巻多細胞体の構築と細胞接着システム"共立出版. 208 (2001)