| 研究課題/領域番号 |
13470039
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
病態医化学
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| 研究機関 | 関西医科大学 |
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研究代表者 |
伊藤 誠二 関西医科大学, 医学部, 教授 (80201325)
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| 研究分担者 |
松村 伸治 関西医科大学, 医学部, 助手 (70276393)
山田 久夫 関西医科大学, 医学部, 教授 (00142373)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| キーワード | 脊髄 / 神経因性疼痛 / トランスジェニックマウス / 神経幹細胞 / nestin / GFP / 一酸化窒素 |
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| 研究概要 |
本研究は山口正洋博士(東大医学研究科)から供与された神経幹細胞に発現する中間径フィラメントnestinのプロモーター制御下に蛍光タンパクGFPを組み込んだトランスジェニックマウス(pNestin-GFPマウス)を用いて、触覚刺激による痛覚(アロディニア)の発症機構における神経再生と神経回路網の形成の関与に焦点をあてた。以前に確立したプロスタグランジン髄腔内注入モデルに加え、選択的第5腰髄脊髄神経切断(SNL)モデルをマウスで確立し、アロディニアを誘発した。
正常マウスで腰髄とDRGにおけるGFPの発現パターンを胎児期から成体までの発達段階で詳細に検討した結果、胎児では脊髄の中心管が強く染色され、生後日が進むにつれて蛍光強度はさがるものの、中心管周囲の細胞がGFP陽性となった。腰髄の切片でも中心管の周囲が強く染まった。DRGでは、一次求心性線維を出している神経細胞には発現せず、神経細胞を取り囲むpericytesに強く発現していた。手術後2、3日目に後角の両側とも全体にGFP陽性細胞が増加した。炎症が消褪し、神経因性疼痛が確立する7日目では結紮した肢の脊髄後角にGFP陽性細胞が有意に増加した。このGFP陽性細胞は、神経細胞、アストログリアのマーカーいずれに対しても共染されなかった。GFP陽性細胞は主として中心管付近に存在するが、SNLモデルで中心管付近にNOS活性が上昇することを示した。これまで中心管付近への情報がどのように慢性痛、さらに神経可塑性と関係しているのか不明であったが、示唆を与えるものである。侵害性刺激に応じてGFP陽性細胞がどこで増殖し、どこから遊走して神経細胞やグリア細胞に分化するか明らかにするために、BrdUで染色して痛覚情報が入力する中心管近傍と後角表層で細胞分裂していることを示した。
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