プレT細胞特異的転写因子によるT細胞分化の制御機構

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470068
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 斉藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究院, 教授 (50205655)
• 研究分担者: 高瀬 完 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (40333489) ; 山崎 晶 千葉大学, 大学院・医学研究院, 助手 (40312946)
• キーワード: 胸腺分化 / プレT細胞レセプター / pTα鎖 / Ebox / E2A / HEB / プロモーター / 転写制御

研究概要

胸腺におけるT細胞分化の過程でCD4^-CD8^-(DN)細胞に発現するプレT細胞レセプターは、pTα鎖とTCRβ鎖のヘテロダイマーからなり、pTα欠損マウスではほとんどのTCRαβ^+T細胞の分化が阻害される。しかし、pTα鎖の発現を含むT細胞分化制御のメカニズムは依然不明な点が多い。我々は、プレT細胞の分化制御機構を解明するために、(1)pTα鎖のプロモーター領域の解明、(2)プレT細胞特異的な分子の同定解析、を世界に先駆けて行った。
(1)PTα鎖プロモーター領域の解析から、転写開始点から上流180bpに調節部位が存在し、タンデムなE-boxが転写に重要であることが判明した。ゲルシフト解析より、この領域に結合するE蛋白はE2AおよびHEBであることがわかった。PTαプロモーターへの結合は、T細胞分化が進むと減少し、胸腺SP細胞・成熟T細胞では、この領域に会合するこれらとは異なるE-box結合分子の存在が示唆された。
(2)pTα^+細胞マイナスpTα-細胞のサブトラクションから単離した新規分子RITは、pTαを発現するCD25^+DN細胞でのみ発現している。細胞株でも、in vivoでRag欠損マウスに抗CD3抗体を投与することによっても、DNからDPに分化するとRITの発現が減少した。In vivo機能を解析するために、ES細胞へのhomologous recombinationを用いて、RIT欠損マウスを作製することに成功した。

研究成果

• [文献書誌] Arase, H.: "Negative regulation of expression and function of Fcγ RIII by CD3ζ in murine NK cells"J.Immunol. 166・1. 21-25 (2001)
• [文献書誌] Tomita, K.: "Cytokine-independent Jak3 activation upon TCR stimulation through direct association of Jak3 and the TCR complex"J.Biol.Chem.. 276・27. 25378-25385 (2001)
• [文献書誌] Arase, H.: "The mouse NK cell-associated antigen recognized by DX5 mAb is CD49β(α,integrin,VLA-2)"J.Immunol.. 167・3. 1141-1144 (2001)
• [文献書誌] Takeuchi, A.: "E2A and HEB activate the pre-TCRα promoter during immature T cell development"J.Immunol.. 167・4. 2157-2163 (2001)
• [文献書誌] Yamasaki, S.: "Docking protein Gab2 is phosphorylated by ZAP-70 and negatively regulates T cell recepor signaling by recruitment of inhibitory molecules"J.Biol.Chem.. 276・48. 45175-45183 (2001)
• [文献書誌] Itoh, K.: "Negative regulation of immune synapse formation by anchoring lipid raft to cytoskeleton through Cbp-EBP50-ERM assembly"J.Immunol.. 168・2. 541-544 (2002)
• [文献書誌] Azeredo da Silveira, S.: "Complement activation selectively potentiates the pathogenicity of the IgG2b and IgG3 isotypes of a high-affinity anti-erythrocyte autoantibody"J.Exp.Med.. (In press).
• [文献書誌] Ioan-Facsinay, A.: "Fcγ RI(CD64)contributes substantially to severity of arthritis,hypersensitivity responses and protection from bacterial infection"Immunity. (In press).
• [文献書誌] Yokosuka, T.: "Predominant role of TCRα chain in forming pre-immune TCR repertoire revealed by clonal TCR reconstitution system"J.Exp.Med.. (In press).