| 研究課題/領域番号 |
13470088
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
市原 学 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (90252238)
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| 研究分担者 |
柴田 英治 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90206128)
山田 哲也 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 助手 (90303635)
上島 通浩 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 講師 (80281070)
束村 博子 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (00212051)
前多 敬一郎 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (30181580)
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| キーワード | 1-ブロモプロパン / N-Acetyl-S-propylcysteine / 生殖毒性 / クレアチンキナーゼ / SH基 / アポトーシス / 神経毒性 / 神経特異蛋白 |
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| 研究概要 |
1.1-ブロモプロパン(1-BP)曝露マーカーN-acetyl-S-propylcysteineの解析
中国1-BP工場の労働者29人から得た尿各100μlに内部標準D7-N-acetyl-S-propylcysteine(1mM)を10μl添加し、酢酸エチルによって抽出した。濃縮後、TBDMS誘導体化をし、GC-MSによってIon203、210を測定した。尿中N-acetyl-S-propylcysteineは曝露濃度と良く相関し、特異的、敏感な曝露指標であることが明らかとなった。
2.1-BP暴露による中枢影響の分子マーカーを用いた解析
36匹のウィスター系ラットを8匹ずつの4群に分け、3群に対し1-BP200ppm、400ppm、800ppmを1日8時間、7日間曝露した。残りの群は対照群として新鮮空気のみを与えた。実験の最後に麻酔下で賭殺し、中枢神経の生化学的分析を行った。神経特異蛋白質γ-エノラーゼ、総グルタチオン、非蛋白スルフヒドリル(SH)基は、大脳および小脳で減少した。クレアチンキナーゼ(CK)活性は、脳、脊髄の全部位で量依存的に減少したが、これは酵素免疫法で定量したCKB量の変化では説明できず、1-BP暴露によってCKの酵素阻害がおきていることが示唆された。
3.2-BP暴露による生殖細胞アポトーシス
ラットに1350mg/kgの2-BPを1-5日間投与し、1回,2,3,5回投与後、最終投与後2または9日後に賭殺した。光学顕微鏡、電子顕微鏡観察、DNA断片のTUNEL法染色、低分子量DNA電気泳動、Bcl-2 family蛋白、FasレセプターおよびリガンドのWestern blottingを行った。その結果、2-BPが、精巣胚細胞のアポトーシスを引き起こし、その過程には、Bcl-2 family遺伝子とFasシグナルシステムが関与していることがわかった。
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