2001 年度実績報告書

HMG1蛋白質およびその受容体分子の体内動態と分布に関する基盤解析

研究課題

研究課題/領域番号	13470108
研究機関	聖マリアンナ医科大学
研究代表者	尾崎承一聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (00231233)
研究分担者	小池薫東北大学, 医学研究科, 助教授 (10267164) 吉田充輝東京理科大学, 基礎工学部, 教授 (20005648) 村上雅朗京都大学, 医学研究科, 助手 (90301738) 大矢和彦医学生物学研究所, 伊那研究所応用技術部, 主任研究員
キーワード	抗好中球細胞質抗体 / High Mobility Group / 抗HMG1抗体 / マススクリーニング / 可溶性HMG1蛋白質 / サンドイッチELISA / ショック患者 / RAGE
研究概要	申請者らは抗好中球細胞質抗体の対応抗原のひとつとしてHigh Mobility Group蛋白質HMG1を同定し、抗HMG1抗体の臨床的意義を解析してきた。本研究では、自己抗原としてのHMG分子、特に分泌蛋白質としてのHMG1分子の機能と動態を解析するために、HMG1分子の血液・体液レベルでの動態解析とHMG1の受容体分子の分布解析を行う。本年度は、HMG1蛋白質の簡便なマススクリーニング的な定量システムを樹立し、患者血清レベルでの可溶性HMG1蛋白質の変動を解析した。患者として、種々の自己免疫疾患患者と感染症を含む種々のショック患者を対象とした。まず、これまでに作製済みのHMG1に対するポリクローナル/モノクローナル抗体を用いて可溶性HMG1の定量システムを開発した。具体的には、(a)リコンビナントHMG1希釈列(または未知量のHMG1含有サンプル)とポリクローナル抗HMG1抗体によるimmunoblottingの反応強度を化学発光として読み取る系、および、(b)ポリクローナル/モノクローナル抗体を用いたサンドイッチELISAの系を構築して両者を比較検討した。その結果、後者の系で10ng/ml以上の血清HMG1の測定が可能となり、病態としては種々のショック患者のうち、重篤で致死的な状態の血清にのみ検出された。検出感度を上げるために、新たにポリクローナル抗体を作製して検討する予定である。一方、HMG1の受容体分子として既に報告されているRAGEの疾患状態での発現解析とRAGE以外の受容体分子の新規クローニングのために、RAGEに対するモノクローナル抗体の作製、RAGE遺伝子およびその変異株のトランスフェクタント細胞株の作製、HMG1依存性の細胞増殖増強を示す胆管細胞株のcDNAライブラリーの構築などの準備を開始した。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Ochiai K., Ozaki S., et al.: "Genetic regulation of anti-erythrocyte autoantibodies and splenomegaly in autoimmune hemolytic anemia-prone New Zealand Black mice"Int. Immunol.. 12・1. 1-8 (2000)
[文献書誌] Tanaka M., Ozaki S., et al.: "Cloning of novel soluble gp130 and detection of its neutralizing auto-antibodies in rheumatoid arthiritis"J. Clin. Invest.. 106・1. 137-144 (2000)
[文献書誌] Ma W., Ozaki S., et al.: "Detection of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in MRL/Mp-lpr/lpr mice and analysis of their target antigens"Autoimmunity. 32. 282-291 (2000)
[文献書誌] Yahata K., Ozaki S., et al.: "Molecular cloning and expression of a novel klotho-related protein"J. Mol. Med.. 78. 389-394 (2000)
[文献書誌] Okazaki T., Ozaki S., et al.: "Antigen-specific Th1 cell as direct effectors of Propionibacterium acnes-primed lipopolysaccharide-induced hepatic injury"Int. Immunol.. 13・5. 607-613 (2001)
[文献書誌] 尾崎承一: "血管炎症候群の診断と病態把握:免疫血清学的検査。「血管炎」"朝倉書店(東京)長澤俊彦監修・橋本博史編集. (2001)

2001 年度 実績報告書

HMG1蛋白質およびその受容体分子の体内動態と分布に関する基盤解析

研究代表者

尾崎 承一 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (00231233)

研究成果

[文献書誌] Ochiai K., Ozaki S., et al.: "Genetic regulation of anti-erythrocyte autoantibodies and splenomegaly in autoimmune hemolytic anemia-prone New Zealand Black mice"Int. Immunol.. 12・1. 1-8 (2000)

[文献書誌] Tanaka M., Ozaki S., et al.: "Cloning of novel soluble gp130 and detection of its neutralizing auto-antibodies in rheumatoid arthiritis"J. Clin. Invest.. 106・1. 137-144 (2000)

[文献書誌] Ma W., Ozaki S., et al.: "Detection of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in MRL/Mp-lpr/lpr mice and analysis of their target antigens"Autoimmunity. 32. 282-291 (2000)

[文献書誌] Yahata K., Ozaki S., et al.: "Molecular cloning and expression of a novel klotho-related protein"J. Mol. Med.. 78. 389-394 (2000)

[文献書誌] Okazaki T., Ozaki S., et al.: "Antigen-specific Th1 cell as direct effectors of Propionibacterium acnes-primed lipopolysaccharide-induced hepatic injury"Int. Immunol.. 13・5. 607-613 (2001)

[文献書誌] 尾崎承一: "血管炎症候群の診断と病態把握:免疫血清学的検査。「血管炎」"朝倉書店(東京)長澤俊彦監修・橋本博史編集. (2001)

2001 年度実績報告書

尾崎承一聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (00231233)