胃発癌におけるガストリン受容体遺伝子変異の関与についての研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470120
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 千葉 勉 京都大学, 医学研究科, 教授 (30188487)
• 研究分担者: 譽田 芳孝 京都大学, 医学研究科, 助手 (90261867)
• キーワード: 胃癌 / ガストリン受容体 / Cキナーゼ / MAPキナーゼ / ヘリコバクタ・ピロリ

研究概要

ヒト胃癌組織56症例について、MSI lociのstandard panelによりMSI陽性とした例は24症例存在した。56症例についてガストリン受容体遺伝子のエクソン5のpolyT8を含んだ100baseを増幅するように設定したprimerでPCRをおこなった後シーケンスを施行した。また変異が見出された例についてTAクローニングをおこない、さらにシーケンスした。以上の結果、ガストリン受容体遺伝子変異はMSI陽性24例中8例に、MSI陰性32例中0例に認められた。また変異例では全例ヘテロであった。この変異は、年齢、性、さらに血清ガストリン、ペプシノーゲン値とは関係がなかった。またヘリコバクタ感染の有無とも関係なかったが、変異陽性例では、difuse typeの胃癌が8例中4例と、変異のない48例中6例に比較して明らかに多かった。なおpolyT8の変異については、T6が1例、T7が7例存在した。T7ではC端側がストップコドンになることが想定された。これらガストリン遺伝子異常を呈する胃癌症例6例中2例において一部同様の遺伝子変異が正常粘膜にも存在することが明らかとなった。
一方、ヒト胃癌細胞株でも同様の検討をおこなったが、胃癌細胞株14株中MSI陽性は6株で、ガストリン遺伝子の変異はそのうち2例(KATO3,MKN45)に認められた。さらにこの2例とも遺伝子異常はヘテロで、正常遺伝子が存在した。またこの2例はともにT7変異であった。
以上、ヒト胃癌のMSI陽性症例の約30%にガストリン受容体遺伝子の変異が存在することが明らかとなった。またこの変異はdifuse typeの胃癌に多い傾向が認められた。現在この変異ガストリン受容体遺伝子のcDNAクローニングに成功しており、今後これを培養細胞に導入して変異ガストリン受容体の機能解析をおこなう予定である。

研究成果

• [文献書誌] Kazumori H, Chiba T, et al.: "Analysis of gastrin receptor gene expression in proliferating cells in the neck zone of gastric fundic glands using laser capture microdissection"FEBS Lett. 489. 208-214 (2001)
• [文献書誌] Kanai M, Chiba T, et al.: "TGF-α inhibits apoptosis of murine gastric pit cells through NF-κB-dependent pathway"Gastroenterology. 121. 56-57 (2001)
• [文献書誌] Fukui H, Chiba T, et al.: "Genetic alteration of gastric carcinoma into duodenal neuroendocrine cell tumor"Gut. 48. 853-856 (2001)
• [文献書誌] Ohana M, Chiba T, et al.: "Blocking of IL-7R signaling prevents the development of Helicobacter felis induced gastritis in mice"Gastroenterology. 121. 329-336 (2001)
• [文献書誌] Nakajima T, Chiba T, et al.: "Gastrin stimulates the growth of gastric pit cell precursors by inducing its own receptors"Am J Physiol. (in press). (2002)
• [文献書誌] Fukushima T, Chiba T, et al.: "Genetic analysis of the DNA-dependent protein kinase reveals an inhibitory role of Ku in late S-G2 phase DNA double-strand repair"J Biol Chem. (in press). (2002)
• [文献書誌] Chiba T: "Factors contributing to the development of gastric cancer due to Helicobacter pylori infection"Current Gastroenterol Report. (in press). (2002)
• [文献書誌] Watanabe N, Chiba T, et al.: "Regression of fundic gland polyps following acquisition of helicobacter pylori"Gut. (in press). (2002)
• [文献書誌] Morita Y, Chiba T, et al.: "Identification of zanthine dehydrogenase/zanthine oxidase as a rat Paneth cell zinc-binding protein"Biochim Biophys Acta. 1540. 43-49 (2001)
• [文献書誌] Ueda Y, Chiba T, et al.: "The transcriptional activities of p73 splicing variants are regulated by inter-variant association"J Biochem. 356. 859-866 (2001)