若年性パーキンソン病(AR-JP)の原因遺伝子パーキンの変異及び機能解析

2002 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 13470136
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 神経内科学
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 服部 信孝 順天堂大学, 医学部, 助教授 (80218510)
• 研究分担者: 水野 美邦 順天堂大学, 医学部, 教授 (30049043) ; 小林 智則 順天堂大学, 医学部, 講師 (50266053)
• 研究期間 (年度): 2001 – 2002
• キーワード: ユビキチンリガーゼ / パーキン蛋白 / ユビキチン・プロテアソーム系 / 若年性パーキンソン病 / 基質 / パエル受容体 / 糖化修飾α-シヌクレイン / CDCrel-1

研究概要

若年性パーキンソン病(AR-P)の原因遺伝子パーキンはユビキチンリガーゼであることが我々の研究グループにより報告されている.Loss-of-function型変異効果が予想されるAR-JPではパーキン蛋白が分解する基質が分解されずに蓄積することで細胞死が誘導されることが予想される.従って,その基質同定が最重要課題である.そこでヒト脳cDNA libraryを用いてYeast two hybrid screeningを行い14種のクローンを単離できた.そのうち既に基質候補として報告されているCDCrel-1を我々も単離できており,1)CDCrel-1がシナプス小胞に関する分子でありexocytosisに関与すること,2)パーキン蛋白の局在もシナプスにあること,3)神経細胞でシナプスが特によく発達していることを含めてパーキン蛋白のexocytosisの関与について検討した.方法としてはヒトGrowth hormone (GH)をtracerにパーキンcDNAとdouble transfectionを行い脱分極化及び非脱分極化で高感度ELISAにてヒトGHを測定した.CDCrel-1についてはoverexpression状態であってもexocytosisの抑制は観察されなかったが,パーキン蛋白のRING fingerドメインに変異を持つ変異パーキン蛋白ではドミナントネガティブ効果的にexocytosisを抑制した.これら結果からはパーキン蛋白はシナプスにあってexocytosisに関与していることが予想された.更に我々は理化学研究所脳科学センターの高橋良輔先生との共同研究でERストレスに関与するパエル受容体もその基質の一つであることを報告している.実際にパーキン遺伝子変異を確認できているAR-JP剖検脳を用いて免疫組織化学的検討を行った.用いた4例について検討したところexon 2に変異のある1症例にパエル受容体の蓄積を認めた.他の症例においてはその蓄積を認めなかった.少なくともパエル受容体の蓄積を1例に認めたことは基質候補して可能性の高い事を示す.この1例のみにパエル受容体の蓄積を認めたことの解釈としては,この症例が最も変異効果が強く殆どの分子が存在しないことにある.更に症例の蓄積を行いパエル受容体について検討する予定である.変異については700例の症例について行い劣性遺伝性であれば約50%の頻度で変異が存在していることがわかった.また優性遺伝性を示す家系でも変異が存在していた.この解釈としてはcarrierであっても年齢などの効果により発症しうることを示している.つまりパーキン遺伝子のcarrierもパーキンソン病発症の危険因子となることが予想された.現在変異-臨床型について詳細な検討を加えている.

研究成果

• [文献書誌] Takanashi M, et al.: "Iron accumulation in the substantianigra of autosomal recessive juvenile parkinsonism (ARJP)."Parkinsonism Relat. Disord 311-314. 7. 311-314 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Shimura S, et al.: "Ubiquitination of a novel form of α-synuclein by parkin from human brain : implications for Parkinson disease"Science. 293. 265-269 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Lu CS, et al.: "Clinical and genetic studies on familial parkinsonism : the first report on a parkin gene mutation in a Taiwanese family"Mov Disord. 16. 164-166 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kubo S, et al.: "Parkin is associated with cellular vesicles"J Neurochem. 78. 42-54 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Wang M, et al.: "Expression of parkin and a parkin-interacting protein, ubiquitin-conjugating enzyme, UbcH7 in the developing rat brain"J Neurochem. 77. 1561-1568 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Imai Y, et al.: "An unfolded putative transmembrane polypeptide, which can lead to endoplasmic reticulum stress, is a substrate of parkin"Cell. 105. 891-902 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Hattori N, et al.: "Ubiquitin-proteasome pathway is a key to understanding of nigral degeneration in autosomal recessive juvenile parkinson's disease. In : Mapping the progress of Alzheimer's and Parkinson's disease"edited by Mizuno Y, Fisher A, Hanin I, Kluwer Academic/Plenum publishers. 564 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takanashi,M, Mochizuki,H, Yokomizo,K, Hattori,N, Mori,H, Yamamura,Y, Mizuno,Y: "Iron accumulation in the substantia nigra of autosomal recessive juvenile parkinsonism (ARJP)"Parkinsonism Relat. Disord. 7. 311-314 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Mellick,GD, Buchanan,DD, Hattori,N, Brookes,AJ, Mizuno,Y, Le,Couteur,DG, Silbum,PA: "The parkin gene S/N167 polymorphism in Australian Parkinson's disease patients and controls"Parkinsonism Relat Disord. 7. 89-91 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Lu,CS, Wu,JC, Tsai,CH, Chen,RS, Chou,YH, Hattori,N, Yoshino,H, Mizuno,Y: "Clinical and genetic studies on familial parkinsonism: the first report on a parkin gene mutation in a Taiwanese family"Mov Disord. 16. 164-166 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kubo,S, Kitami,T, Noda,S, Shimura,H, Uchiyama,Y, Asakawa,S, Minoshima,S, Shimizu,N, Mizuno,Y, Hattori,N: "Parkin is associated with cellular vesicles"J Neurochem. 78. 42-54 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Wang,M, Suzuki,T, Kitada,T, Asakawa,S, Minoshima,S, Shimizu,N, Tanaka,K, Mizuno,Y, Hattori,N: "Expression of parkin and a parkin-interacting protein, ubiquitin-conjugating enzyme. UbcH7 in the developing rat brain"J Neurochem. 77. 1561-1568 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nisipeanu,P, Inzelberg,R, Abo,Mouch,S, Carasso,RL, Blumen,SC, Zhang,J, Matsumine,H, Hattori,N, Mizuno,Y: "Parkin gene causing benign autosomal recessive juvenile Parkinsonism"Neurology. 56. 1573-1577 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Shimura,H, Schlossmacher,MG, Hattori,N, Frosch,MP, Trockenbacher,A, Schneider,R, Mizuno,Y, Kosik,KS, Selkoe,DJ: "Ubiquitination of a novel form of a-synuclein by parkin from human brain: implications for Parkinson disease"Science. 293. 263-269 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Imai,Y, Soda,M, Inoue,H, Hattori,N, Mizuno,Y, Takahashi,R: "An unfolded putative transmembrane polypeptide, which can lead to endoplasmic reticulum stress, is a substrate of parkin"Cell. 105. 891-902 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Shimo-Nakanishi, Y, Urabe,T, Hattori,N, Watanabe,Y, Nagao,T, Yokochi,M, Hamamoto,M, Mizuno,Y: "Polymorphism of the lipoprotein lipase gene and risk of atherothrombotic cerebral infarction in the Japanese."Stroke. 32. 1481-1486 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Jeon,BS, Kim,JM, Lee,DS, Hattori,N, Mizuno,Y: "An apparently sporadic case with Parkin gene mutation in a Korean woman"Arch Neurol. 58. 988-989 (2001)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hyun,D-H, Lee,M-H, Hattori,N, Kubo,S, Mizuno,Y, Halliwell,B, Jenner,P: "Effect of Wild-Type or Mutant Parkin on Oxidative Damage, Nitric Oxide, Antioxidant Defences and the Proteasome"J Biol Chem. 277. 28572-28577 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Takanashi,M, Mori,H, Arima,K, Mizuno,Y, Hattori,N: "Expression pattern of tau mRNA isoforms correlates with susceptible lesions in progressive supuranuclear palsy and corticobasal degeneration"Mol Brain Res. 104. 210-219 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Schossmacher,MG, Frosch,MP, Ping-Gai,W, Medina,M, Sharma,N, Forno,L, Ochiishi,T, Shimura,H, Sharon,R, Hattori,N, Langston,JW, Mizuno,Y, Hyman,BT, Selkoe,DJ, Kosik,K: "Parkin localizes to the Lewy bodies of Parkinson disease and dementia with Lewv bodies"Am J Pathol. 160. 1655-1667 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Tanaka,M, Fuku,N, Takeyasu,T, Guo,L-J, Hirose,R, Kurata,M, Borgeld,HJ, Yamada,Y, Maruyama,W, Aral,Y, Hirose,N, Oshida,Y, Sato,Y, Hattori,N, Mizuno,Y, Iwata,S, Yagi,K: "Golden Mean to Longevity : Rareness of Mitochondrial Cytochrome b Variants in Centenarians but Not in Patients with Parkinson's Disease"J Neurosci Res. 70. 347-355 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Nomiyaima,T, Tanaka,Y, Hattori,N, Nishimaki,K, Nagasaka,K, Kawamori,R, Ohta,S: "Accumulation of somatic mutation in mitochonrial DNA exracted from Peripheral blood cells in diabetic patients"Diabetologica. 45. 1577-1583 (2002)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kobayashi,H, Kruger,R, Maropoulou,K, Wszolek,Z, Chace,B, Taka,H, Mineki,R, Murayama,K, Riess,O, Mizuno,Y, Hattori,N: "Haploinsufficiency at the a-synuclein gene underlies phenotype severity in familial Parkinson's disease"Brain. 126. 32-42 (2003)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より